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1. 貼壁細胞的消化:
a.吸去培養液,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
b.加入少量胰酶細胞消化液,略蓋過細胞即可,室溫放置30秒至2分鐘。不同的細胞消化時間有所不同。
c.顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來。此時吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的*細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
d.如果發現消化不足,則加入胰酶細胞消化液重新消化。
如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落,直接用胰酶細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000-2000g離心1分鐘,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2. 組織的消化:
a.不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
附錄:不同胰酶細胞消化液的比較和選擇
1. 如果希望消化能力比較強,推薦選擇C0201胰酶細胞消化液(0.25%胰酶)和C0203 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅),這兩種胰酶細胞消化液都含有EDTA,消化能力相對更強一些。
2. 如果希望觀察比較方便,推薦選擇含酚紅的C0203 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅)和C0207 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅,不含EDTA)。
3. 對于酚紅可能會干擾后續的測試分析,推薦選擇不含酚紅的C0201 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶)和C0205 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,不含EDTA)。
4. 對于EDTA可能會干擾后續的測試分析時,推薦選擇不含EDTA的C0205 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,不含EDTA)和C0207 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅,不含EDTA)。
5. 對于胰酶特別敏感的細胞,即對于消化時間特別快、消化時間比較難控制的情況,推薦選擇C0202胰酶細胞消化液(0.05%胰酶)或C0204 胰酶細胞消化液(0.05%胰酶, 含酚紅)。
相關產品:
產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
C0201 | 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶) | 100ml |
C0202 | 胰酶細胞消化液(0.05%胰酶) | 100ml |
C0203 | 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶, 含酚紅) | 100ml |
C0204 | 胰酶細胞消化液(0.05%胰酶, 含酚紅) | 100ml |
C0205 | 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶, 不含EDTA) | 100ml |
C0207 | 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶, 含酚紅,不含EDTA) | 100ml |
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