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上海豐壽實業有限公司
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閱讀:629發布時間:2015-2-6
我公司快速反應的售后服務機制也是客戶們贊揚的一大優點,我公司有專業的技術人員可以為客戶們解決售前、售中、售后的ELISA試劑盒技術問題。近期問題解決示例:
問題1:新手做ELISA試劑盒,板子平底圓底和V型底怎么選擇?還有結合力選擇高還是中的怎么去確定?
解析:市面上可以見到的有F、C、U、V四種底部,由于大多數ELISA試劑盒是從底部觀測,F和C底的觀測面積較大,比較常用。高吸附酶標板,蛋白吸附量較大(抗體用量也zui省),但是非特異性吸附也會相應提高,中吸附,蛋白吸附量較小,但是非特異性吸附也小,檢測背景較低;低吸附,主要適用于時間分辨熒光檢測這類對背景有較高要求的;氨基或其他特殊表面,適用于食品安全小分子間接競爭法。
問題2:看了一些帖子,說是通過抗原濃度,抗體的稀釋倍數,設立梯度來確定效果,可是我想問測的的結果怎么看哪個效果好呢?看了一篇文獻他是說OD450值為1左右條件作為*條件,很是不解啊,我是做雙抗夾心法的。
解析:這個確實有好幾種因素來確定,雙抗夾心的話,有包被抗體的濃度、緩沖液的選擇、孵育時間等好幾種因素,您要測試*的效果,就要控制變量的方法來確定。
一般來說,如果你是夾心法的話主要要用棋盤法確定一抗和抗原的濃度,二抗一般不需要怎么摸條件,你選一到兩個說明書上*的濃度即可。棋盤法中選OD值在1左右的一抗濃度,(此時,應該有多個1對應的濃度)你要選一個在這個濃度下,ELISA試劑盒測抗原的線性拉得zui寬的那一個。如果一抗濃度太高,想要測的抗原基本都可被吸附,這樣就達不到靈敏檢測的目的;如果一抗濃度太低,OD值比1小太多又會增大誤差。另外,抗體稀釋液一般就是在洗滌液中加入一定濃度的不相關蛋白。這樣可以減小非特異吸附(吐溫和蛋白均有此作用),你直接用PBS的話可能會造成陰性OD過高
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