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檢查新生牛的血清病毒法

閱讀:377發布時間:2015-6-3

1. 細胞培養法  
(1)非血吸附病毒檢查  
ELISA試劑盒將新生牛血清供試品分別接種到人源(如*)、猴源(如Vero細胞)以及牛腎傳代細胞三種細胞,采用的牛腎傳代細胞系應證明無牛病毒的污染。每種細胞至少接種6瓶,每瓶細胞懸液接種量不少于培養液總量的25%。于36±1℃培養21天。接種的每種細胞都應同時設立牛血清陰性對照和病毒陽性對照,陰性對照用牛血清應證明無牛病毒污染。
培養過程中可根據細胞生長情況更換細胞培養液,每次更換培養液前應觀察(肉眼/顯微鏡)有無細胞病變出現。培養到期后,陰性對照應無任何細胞病變出現,陽性對照應出現典型的細胞病變,試驗成立。ELISA試劑盒供試品檢查應不出現任何細胞病變為陰性,符合要求。 
(2)血吸附病毒檢查  
ELISA試劑盒將上述接種供試品的每種細胞取2瓶進行血吸附病毒檢查。用0.2%~0.5%雞和豚鼠紅細胞混合懸液覆蓋于細胞表面,置2~8℃分鐘,然后置20~25℃30分鐘,分別進行鏡檢,觀察紅細胞吸附情況, 供試品檢查結果均應為陰性。試驗同時應設立血吸附陽性對照。 
2. 免疫熒光抗體檢查法  
采用直接或間接免疫熒光抗體檢查法,至少應對牛腹瀉病毒,牛腺病毒、牛細小病毒、呼腸孤病毒、狂犬病病毒以及牛副流感病毒進行檢查,結果均應為陰性。AMBP     Protein    Human    重組人 AMBP / Alpha 1 microglobulin 蛋白 (Fc 標簽)
FGF16     Protein    Human    重組人 / 食蟹猴 FGF16 / FGF-16 蛋白
COL6A3     Protein    Human    重組人 COL6A3 / Collagen-VI 蛋白 (His 標簽)
IGFLR1     Protein    Human    重組人 IGFLR1 / TMEM149 蛋白 (Fc 標簽)
TNFRSF11A     Protein    Human    重組人 TNFRSF11A 蛋白 (His 標簽)
NCAM2     Protein    Human    重組人 NCAM2 / Neural cell adhesion molecule 2 蛋白 (His 標簽)
NCAM2     Protein    Human    重組人 NCAM2 / Neural cell adhesion molecule 2 蛋白 (Fc 標簽)
FZD10     Protein    Human    重組人 Frizzled-10 / FZD10 蛋白 (His 標簽)
FZD10     Protein    Human    重組人 Frizzled-10 / FZD10 蛋白 (Fc 標簽)
KIRREL     Protein    Human    重組人 KIRREL / NEPH1 / KIRREL1 蛋白 (Fc 標簽)
MUSTN1     Protein    Human    重組人 MUSTN1 蛋白 (His 標簽)
ATOX1     Protein    Human    重組人 ATOX1 / HAH1 蛋白 (His 標簽)
RBKS     Protein    Human    重組人 RBKS / Ribokinase 蛋白 (His 標簽)
BIRC7     Protein    Human    重組人 BIRC7 / Livin 蛋白 (His 標簽)
RAB31     Protein    Human    重組人 RAB31 / Rab22B 蛋白 (His 標簽)


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