ELISA試劑盒 文獻報道81 %的ADSCs克隆至少向一個譜系分化, 52 %的ADSCs克隆向2個或更多的譜系分化，與ADSCs是一種多能成體干細胞而不是混合的專能祖細胞的假說相符合[5]。通過體外培養發現[6]，ADSCs呈梭形生長，胞漿和核仁豐富，呈平行排列或漩渦樣生長。呈現穩定一致的倍增周期，均約55~60 h。ADSCs體外培養時，分裂增殖能力強，無明顯的生長滯緩期，第3天進入對數生*，第6天達到生長峰值，第7天后進入平臺期。傳15代后，細胞的生長增殖能力無明顯下降。
βgal細胞染色是研究細胞衰老中一種常用的實驗手段，pH6.0時衰老的細胞會呈現βgal陽性染色。以此技術檢測ADSCs在傳代過程中的衰老程度，結果發現，第1代ADSCs均染色陰性，第7~l5代ADSCs中才出現陽性染色細胞，隨代次增加陽性染色細胞數雖有所增加，但第l5代時也僅約5 %。這提示ADSCs不但具有較強的再生能力，而且兼有低衰老性特征，有望成為組織工程中理想的干細胞來源。
ELISA試劑盒采用流式細胞儀分析ADSCs的表面標志，發現CD9、CD10、CD13、CD29、CD44、CD71、CD90、CD105（SH2）、SH3、CD166均為陽性，其中CD105、CD166為間充質干細胞相對特異性標志，而CD31、CD34、CD45等造血細胞標志物和人類主要組織相容抗原Ⅱ型HLADR均為陰性，上述細胞表型與骨髓來源的間充質干細胞基本相同[7，8]。
二、ADSCs與骨髓干細胞的異同點
De Ugarte等[9]以及李公賓等[10]通過分別獲取骨髓與脂肪組織，并對ADSCs和骨髓間充質干細胞（bone marrowderived mesenchymal stem cells, BDMSCs ）進行了比較，初步證明二者均源自中胚層,無論在細胞生長增殖方式、多向分化的潛能、外源基因的導入還是免疫原性等都無顯著差異，但是兩者仍有一定區別。其差異主要表現在：⑴來源及獲取方法:BDMSCs需要骨髓穿刺，經密度梯度離心方法獲得，量少，約1×l05個骨髓間質細胞方能獲取1個間充質干細胞，而且痛苦大;ADSCs來自脂肪組織抽吸物，簡單消化、離心等即可獲取，量大，300 ml脂肪抽吸物中一般可得到2×108～6×108 個細胞，痛苦小。⑵細胞表面抗原不同：ADSCs為CD49+,CD106;BDMSCs為CD49,CD106+ 。⑶體外培養方式不同：BDMSCs體外培養時，對血清質量與來源要求較高，但ADSCs細胞體外增殖和分化時無特別要求。
三、ADSCs多向分化能力誘導及檢測指標
ELISA試劑盒1.定向分化為脂肪細胞： 以Eagle細胞培養基（DMEM），加入誘導劑胰島素、1甲基3異丙基黃嘌呤、 或*、*或噻唑烷二酮（一種能活化配體的過氧化物酶增強劑）、泛酸、*和三碘甲腺原氨酸進行誘導培養。7～10 d后，經油紅O或尼羅河紅染色陽性，反轉錄聚合酶鏈式反應（RTPCR）技術檢測到脂蛋白酶的表達，并確定其分泌脂蛋白瘦素[11]。
2.定向分化為軟骨細胞： 三維環境的培養有利于朝軟骨方向分化并且維持其表型。其誘導可采用微團培養的方式[12]，同時培養基中加入轉化生長因子（TGFβ1）、胰島素、轉鐵蛋白等，6 d后加入抗壞血酸二磷酸鹽，促使細胞向軟骨細胞的分化。1周后光鏡下可見到白色的軟骨結節，采用阿藍染色可觀察到軟骨組織所*的硫酸蛋白聚糖表達，免疫組織化學可檢測到結節中的Ⅱ型膠原以及硫酸角質素、*的表達，RTPCR技術可檢測到軟骨膠原的表達。魏義勇等[13]也通過實驗證明，TGFβ1和骨形成蛋白2（BMP2）具有誘導脂肪干細胞向軟骨細胞定向分化的作用。
