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ELISA的原理和類型

閱讀:171發布時間:2015-8-20

ELISA試劑盒的原理:
ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既留存其免疫學活性,又留存酶的活性。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。因為酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。
ELISA的類型
ELISA試劑盒參數雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法,操作步驟如下:
1) 將特異性抗體與固相載體聯結,形成固相抗體。洗滌除去未結合的抗體及雜質。
2) 加受檢標本,保溫反應。標本中的抗原與固相抗體結合,形成固相抗原抗體復合物。洗滌除去其他未結合物質。
3) 加酶標抗體,保溫反應。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。*洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關。
4) 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產物。通過比色,測知標本中抗原的量。
    在科研檢修中,此法合用于檢修各種蛋白質等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要獲得針對受檢抗原的異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶結合物而建立此法。這種雙位點夾心法具有很高的特異性,而且可以將受檢標本和酶標抗體一起保溫反應,作一步法檢測。如應用單克隆抗體,一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗,分別用于包被固相載體和制備酶結合物。

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B6
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-C2
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-C4
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D2
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D3
tTA基因修飾的小鼠睪丸畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-1A3
tTA基因修飾的小鼠睪丸畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-3A1
tTA基因修飾的小鼠睪丸畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-3E5
tTA基因修飾的小鼠睪丸畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-4D6
tTA基因修飾的小鼠睪丸畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-1D3
tTA基因修飾的小鼠睪丸畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-1F3
tTA基因修飾的小鼠睪丸畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-3C3
tTA基因修飾的小鼠睪丸畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-3C8
小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4C5
雜交瘤(B類);C3110D2B2
雜交瘤(B類);C3110D2E11
雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2C7
雜交瘤(B類);Z172A4C4C6F3G12
大鼠源細胞
大鼠垂體瘤細胞;GH3
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12]
大鼠垂體瘤細胞;MMQ
大鼠小腸隱窩上皮細胞;IEC-6
大鼠腦膠質瘤細胞;C6


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