DIY夾心法ELISA試劑盒常見技術(shù)指南：
1、選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對；若選擇兩個單抗，必須識別不同表位的抗體；從同一家公司選擇抗體對。
2、ELISA試劑盒實驗中為了確定*信號和zui低背景應將捕獲抗體（0.5-4μg/ml）和檢測抗體（0.25-2μg/ml）在預實驗中進行彼此相抗的滴定。同時，應包括在適當范圍內(nèi)的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進行操作。
3、標準品的配制：對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書，注意每批的細節(jié)。在使用細胞因子前，瞬時離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細胞因子。根據(jù)每批說明書中的細節(jié)，將凍干的細胞因子復溶。
4、一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml。可利用標準的ELISA試劑盒操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
5、為了優(yōu)化靈敏度，建議過夜孵育標準品和標本。
6、若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng)，應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
7、ELISA試劑盒當測定混合液體中的抗原時，如血清，建議在標本稀釋液中加不相干的Ig.Galectin 1 半乳糖凝集素1抗體
IFITM5 干擾素誘導跨膜蛋白5抗體
phospho-IFNAR1（Tyr466) 干擾素alpha/beta 受體1蛋白抗體
phospho-IFNGR1 (Tyr457) 干擾素gamma受體1蛋白抗體
IF3EI 真核翻譯起始因子3亞基L蛋白抗體
IFIT2 干擾素誘導的三角形四肽重復蛋白2抗體
IFIT1B 干擾素誘導的三角形四肽重復蛋白1B抗體
IBP160 160kDa內(nèi)含子結(jié)合蛋白抗體
IBTK Bruton*激酶抑制劑蛋白抗體
IFI30 γ干擾素誘導蛋白IP30抗體
IFFO 中間絲家族孤啡肽1蛋白抗體
Inversin 內(nèi)臟器官發(fā)育轉(zhuǎn)位相關(guān)蛋白NPH2抗體
Insulin receptor subunit beta 胰島素受體β抗體
ITLN1 內(nèi)皮細胞凝集素HL1抗體
IFN-Alpha 干擾素α抗體
IL-17F 白介素-17F抗體
IL-6 (NT) 白介素6抗體(N端)
IL-6 白介素6抗體
IFNE1 干擾素epsilon 1蛋白抗體
phospho-IKK gamma(Ser43) 磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗體
phospho-IL-1R1(Tyr496) 磷酸化白介素1受體1抗體
IL-3 白介素3抗體
IDI1 異戊烯焦磷酸1抗體
phospho-IRS1(Ser789) 磷酸化胰島素受體底物-1抗體
phospho-IRS1(Ser636 + Ser639) 磷酸化胰島素受體底物-1抗體
