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技術文章

ELISA試劑盒的模式

閱讀:353發布時間:2015-10-14

每種試劑都有其反應模式,其中溫度和溫育時間控制是重要因素。因孵育溫度高,反應時間長,會造成整板本底高,陽性率高。

酶標比色儀簡稱酶標儀,通常指于測讀ELISA試劑盒結果吸光度的光度計。酶標儀的主要性能指標有:測讀速度、讀數的準確性、重復性、度和可測范圍、線性等等。優良的酶標儀的讀數一般可到0.001,準確性為±1%,重復性達0.5%。酶標儀不應安置在陽光或強光照射下,操作時室溫宜在15~30℃,使用前先預熱儀器15-30 分鐘,測讀結果更穩定。

以TMB為底物和以OPD為底物的試劑盒均有使用,而前者比色波長為450nm,后者為492nm,濾光片需根據要求隨時更換。酶標儀給出的數值為敏感波長下的吸光度值與非常感波長下的吸光度值的差。以軟板為載體的試驗,需先將板置于尺度96孔的座架中,才可進行比色。ELISA試劑盒比色時應先以蒸餾水校零點,測讀底物孔(未經任何反應僅加底物液的孔)和空缺孔(以生理鹽水或稀釋液代替標本作全過程的孔),以記實本次試驗的試劑狀況。


ELISA試劑盒就是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質,以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質。聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的,而在洗滌時應把這種非特異性吸附的干擾物質洗滌下來。可以說在ELISA試劑盒操作中,洗滌是zui主要的關鍵技術,應引起操作者的高度重視,操作者應嚴格按要求洗滌,不得馬虎。
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IGLON5 IgLON家族蛋白5抗體
IKAROS 鋅指蛋白IKAROS抗體
Igj 免疫球蛋白j鏈抗體
IP3 receptor 5-三磷酸肌醇受體1抗體
ITPR2 5-三磷酸肌醇受體2抗體
ID3 DNA結合抑制因子3抗體
CD275 誘導協同刺激分子配體CD275抗體
IGSF12 免疫球蛋白超家族成員12抗體
IDH3A 草酰琥珀酸脫羧酶α抗體
IFNA5 干擾素alpha 5蛋白抗體
IGF I 胰島素樣生長因子1抗體
IKK beta KB抑制蛋白激酶β抗體
Involucrin 囊包蛋白/內披蛋白抗體
Insulin Receptor R 胰島素受體相關受體抗體


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