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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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閱讀:138發(fā)布時(shí)間:2017-01-21
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小鼠胎盤(pán)泌乳素(PL)ELISA試劑盒操作步驟:
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為300ng/L,200ng/L ,100ng/L,50ng/L,25ng/L)。
加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
小鼠胎盤(pán)泌乳素(PL)ELISA試劑盒保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個(gè)月
動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 2 三 ( 羥甲基 ) 氨基甲烷鹽酸鹽 100g
動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 3 吲哚 10g
動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 4 6- 芐基氨基嘌呤 1g
動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 5 對(duì)氨基苯磺酸 25g
動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 6 溴化乙錠 (EB) 100mg
昆蟲(chóng)種屬鑒定 PCR Mix 亞精胺 ( 精脒 ) 1g
無(wú)脊椎動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix DEAE 葡聚糖凝膠 A-25 25g
兩棲類和爬行類動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix * 1g
魚(yú)類種屬鑒定 PCR Mix * 1g
鳥(niǎo)類種屬鑒定 PCR Mix 茜素紅 S 25g
哺乳動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 四硼酸鈉,十水 100g
植物種屬鑒定 PCR Mix 1 玉米素 5mg
植物種屬鑒定 PCR Mix 2 淀粉樣 β- 蛋白片段 25-35 250μg
小鼠胎盤(pán)泌乳素(PL)ELISA試劑盒
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