人人類嗜T淋巴細(xì)胞II型病毒（HTLV-II）試劑盒（ELISA） 使用說明書 

? 本試劑盒用于體外定性檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中人 人類嗜T淋巴細(xì)胞II型病毒（HTLV-II）。 

? 有效期：6個(gè)月 

? 保存條件：2-8℃ 

? 本試劑盒僅供科研使用，不得用于臨床診斷 

實(shí)驗(yàn)原理 

    試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被人人類嗜T淋巴細(xì)胞II 型病毒（HTLV-II）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、陰性和陽性對照、HRP標(biāo)記的檢 測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并 在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人人類嗜T淋巴細(xì)胞II型病毒 （HTLV-II）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），判定陰陽性。 

樣本處理及要求 

1. 血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 

2. 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000 ×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 

3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞 會影響測量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體 積比，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。 推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組 78 織細(xì)胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘， 取上清檢測。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯?于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 

注：標(biāo)本溶血會影響最后檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。