如今大家在ELISA實驗中對于購買的標準品都一般保有絕對信任的態度去使用,但是往往在正規單位購買的標準品也存在含量不準確或不合格者,但標準品多數都比較昂貴,有的也就夠一次檢測的,對于這樣的標準品要帶著相對的信任去使用,當出現問題,無法解決時,再考慮純度問題;對于便宜而且量大的標準品,要有一套經過驗證的測定方法。
標準品的純度主要有以下兩種做法:
1.直接測定
考慮用液相的峰面積歸一法,但不清楚在主峰面積達到多少時面積歸一化得出的結果才是準確的。首先,這樣測不是很科學。比如說你采用254nm的波長檢測,有些雜質在這個波長處的響應值很低,這樣這些雜質的量即使很高也不會在圖譜上顯示出來,得出的面積歸一化結果也不可信。直接測定法還有直接滴定和對照品法以及內標法等。
2.間接測定
間接測定是首先知道它的雜質的含量是多少,我們再間接測定樣品的含量。簡單的說就是:
純度=100%-雜質含量%
雜質通常包括水分、無機雜質(比如硫酸鹽、氯化物等)、有機殘留等。