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生物芯片在藥物分析中的應(yīng)用

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  生物芯片技術(shù)是20世紀(jì)90年代初伴隨著人類基因組計(jì)劃的實(shí)施而產(chǎn)生的一門新技術(shù),已成為、大規(guī)模獲取相關(guān)信息的重要手段。它主要通過微加工技術(shù)和微電子技術(shù),將成千上萬與生命相關(guān)的信息集成在一塊厘米見方的硅、玻璃、塑料等材料制成的芯片上,以達(dá)到對基因、配體、細(xì)胞、蛋白質(zhì)、抗原以及其他生物組分準(zhǔn)確、快速地分析和檢測。目前,生物芯片技術(shù)被廣泛研究應(yīng)用于基因序列分析、疾病診斷、藥物研究、微生物檢測、農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)、食品、環(huán)境保護(hù)和檢測等領(lǐng)域,現(xiàn)簡單介紹其在藥物分析中的應(yīng)用。
  
  生物芯片在藥物分析中的應(yīng)用主要是指采用毛細(xì)管電泳芯片/質(zhì)譜系統(tǒng)對化合物庫、血樣和尿樣中的藥物進(jìn)行分析鑒定,具有快速(30S)、準(zhǔn)確、微量等優(yōu)點(diǎn)。毛細(xì)管電泳芯片/質(zhì)譜系統(tǒng)是指將毛細(xì)管電泳芯片和質(zhì)譜聯(lián)用的一套裝置。毛細(xì)管電泳芯片進(jìn)行樣品的分離,而與芯片聯(lián)用的質(zhì)譜則有選擇性的對分離成分進(jìn)行檢測。美國康奈爾大學(xué)的wachs等發(fā)明了一種微型化的離子噴霧裝置。這種裝置適合于與基因芯片的分離裝置、多孔板或帶有待測樣品殘?jiān)谋砻媛?lián)用。這種裝置有兩種版本,一種稱為微型噴霧器,主要與毛細(xì)管電泳芯片聯(lián)用;另一種稱為小型噴霧器,它帶有伸長的吸樣毛細(xì)管,可以插入多孔板孔的底部,所以適合與多孔板聯(lián)用。這種裝置可以幫助人們對芯片分離所得樣品或多孔板中樣品進(jìn)行質(zhì)譜檢測。來自康奈爾大學(xué)同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室的Deng等將玻璃制成的毛細(xì)管電泳芯片與他們自己設(shè)計(jì)的微型離子噴霧裝置連接,使用PE公司的質(zhì)譜系統(tǒng)做檢測,對多種藥物的標(biāo)準(zhǔn)品和血漿樣品進(jìn)行了分析檢測。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明,使用毛細(xì)管電泳芯片/質(zhì)譜系統(tǒng)對小分子化合物進(jìn)行快速(30s)檢測是可行的。這套裝置可以用來對合成的化合物庫和人血漿中重要成分進(jìn)行分析檢測。Ramseier等用芯片毛細(xì)管電泳和硅膠毛細(xì)管電泳檢測尿中苯丙胺及其類似物,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示芯片毛細(xì)管電泳的方法具有更快的分離速度和更高的分離效率。Chiem等則用毛細(xì)管電泳芯片檢測了血清中的茶堿。
  
  生物芯片在中藥鑒定中的應(yīng)用主要是對植物細(xì)胞進(jìn)行基因測序。因?yàn)槿魏我粋€(gè)生物個(gè)體,不受發(fā)育階段影響,其不同組織器官部位以至細(xì)胞都具備相同的遺傳信息,不同生物的遺傳信息是不相同的。因此,利用生物芯片可以準(zhǔn)確無誤的確定中藥的來源。已有學(xué)者開始對地道與非地道藥材如貝母、金銀花等的DNA序列進(jìn)行研究,分離特異核苷酸序列作為探針并制備DNA芯片,進(jìn)行鑒定。在同一時(shí)間內(nèi)能分析大量基因,所以可用于尋找新的有效化學(xué)成分、提高藥物鑒定能力和效率,還可用于中藥復(fù)方組成的鑒定。采用基因芯片技術(shù)鑒定中藥的過程是:①應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)找出待鑒定中藥的特點(diǎn)寡核苷酸序列。(以此寡核苷酸序列作為探針裝配到芯片上。(檢測樣品的準(zhǔn)備(DNA提取、擴(kuò)增和熒光標(biāo)記)@檢測樣品與芯片上探針進(jìn)行雜交:熒光檢測及結(jié)果分析。
  
  用生物芯片技術(shù)還能對中藥的有效成分進(jìn)行鑒定,分子生物學(xué)認(rèn)為中藥有效成分含量受產(chǎn)地、氣候、環(huán)境的影響是通過基因表達(dá)起作用的,基因表達(dá)的變化與中藥特定階段成份特征根本相關(guān)。因此收集標(biāo)準(zhǔn)中藥材、提取DNA、建立CDNA文庫,克隆各基因片段、組成DNA微陣列基因芯片,用芯片與標(biāo)準(zhǔn)藥材RNA雜交,其結(jié)果可結(jié)合計(jì)算機(jī)技術(shù)建立生藥標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)據(jù)庫。用于快速篩選高品質(zhì)藥材,井建立生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。同理,此類基因芯片可以遴選出有效成份組成相近的某稀有或?yàn)l危物種的替代者,開發(fā)新藥資源。這是開發(fā)中草藥使之更為科學(xué)化,打開市場的優(yōu)選方法。

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