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固相載體在ELISA試劑盒測定過程中作為吸附劑和容器,不參與化學反應。可作ELISA試劑盒中載體的材料很多,聚苯乙烯具有較強的吸附蛋白質的性能,抗體或蛋白質抗原吸附其上后仍保留原來的免疫學活性,加之它的價格低廉,所以被普遍采用。
聚苯乙烯為塑料,可制成各種形式。此時酶催化無色的底物生成有色的產物。反應的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內,陰性孔可保持無色,而陽性孔則---間的延長而呈色加強。適當提高溫度有助于加速顯色進行。在定量測定中,加入底物后的反應溫度和時間應按規定力求準確。
定性測定的顯色可在室溫進行,時間一般不需要嚴格控制,有時可根據陽性對照孔和陰性對照孔的顯seqing況適當縮短或延長反應時間,及時判斷。
技術答復可能原因如下:
(1) 水質被金屬離子等污染;防止辦法盡量使用新鮮水或蒸餾水。
(2) 洗滌不充分,樣品中其它成分殘留或酶殘留;防止辦法洗滌液應注滿微孔,充分洗滌。
(3) 移液頭重復使用,未洗凈或消毒不*; 一次性使用。
(4) 酶標板靈敏度過高。
(5) 一抗顯色時間的控制等等,關于ELISA試劑盒的每一步都要注意才行。
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