其實,ELISA試劑盒靈敏度和檢測樣本有些關聯的,如果待測樣本中目標蛋白的濃度比較高,則對靈敏度要求相對小一些。如果待測樣本中目標蛋白的濃度比較低,則必須考慮靈敏度的問題。
一般來說,試劑盒曲線上的小濃度是比較準確的,低于這個值因為與曲線是個“S"型結構有關,所以結果是有偏差的,是一種估算。再加上實驗誤差,所以達不到理想的效果。建議選擇試劑盒時,應該看曲線上小的濃度值,而不是試劑盒上寫的靈敏度。
雖然酶活性調節ELISA試劑盒方法的靈敏度目前并不十分理想,但在酶活性放大ELISA試劑盒中,檢測的靈敏度遠比RIA高。根據質量作用定律。即免疫反應所形成的免疫復合物量與反應物濃度成正比。推測所檢測的待測物分子數為1。已知1個摩爾濃度含6.02×1023個分子,那么理論推測酶活性放大ELISA方法的低檢測限可達1.7×10-24mol/L。雖然在實際應用中由于反應條件和試劑純度以及儀器精度等因素的影響,往往達不到這個水平(大于104個分子),但表明ELISA在靈敏度方面的改進潛力是很大的。
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