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細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞;4D1
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
產品圖片:
細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉湯基礎 規格: 100g 作用: 用于溶血性鏈球菌的增菌培養(參考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名稱: CD36
肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(GB標準) 英文名稱: KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于溶血性鏈球菌及其它營養要求較高的細菌的增菌培養(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名稱: CD97
哥倫比亞瓊脂培養基 規格: 250g 作用: 用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗,還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱: NTRK3
血瓊脂培養基基礎 規格: 250g 作用: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養基,用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗(GB 4789.10-... 英文名稱: HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養基 規格: 250g 作用: 可廣泛應用于細菌的培養,特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養及蠟... 英文名稱: HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規格: 2x5支 作用: 試劑A和試劑B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名稱: SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱: IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名稱: IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名稱: PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名稱: TNF
基礎,傳代用.也可用于消毒效果測定 Nutrient Agar 營養瓊脂(NA) 250
用于環氧乙烷消毒和電離輻射消毒過程監測指示菌(枯草桿菌黑色變種芽孢及短小桿菌芽孢)的培養(GB標準) 0.5% Dextrose Broth 0.5%葡萄糖肉湯培養基 250
用于壓力蒸氣消毒過程監測指示菌(嗜熱脂肪桿菌芽孢)的培養及消毒效果測定 Glucase Peptone Water Medium 溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養基 250
用于真菌、酵母菌增菌 Liquid Sabourand Medium 液體沙氏培養基 250
用于一次性使用衛生用品中溶血性鏈球菌的檢驗 Pick’s Broth Base B 匹克氏肉湯基礎B 250
用于食品中乳酸菌總數測定 Tomato Juice Agar,Modified 改良番茄汁培養基 250
用于食品中乳酸菌總數測定 Chalmers Agar ,Modified 改良MC培養基 250
用于食品中乳酸菌總數測定 MRS Agar Base MRS 瓊脂基礎 250
LBS agar LBS 瓊脂
用于牛奶和乳制品中乳酸菌檢測和分離培養(Merck方法) M17 Agar M17瓊脂 250
用于牛奶和乳制品中乳酸菌檢測和分離培養(Merck方法) M17 Broth M17肉湯 250
用于乳酸菌檢測和分離培養(ACUMEDIA) Lactobacillus Selective Agar 乳酸桿菌選擇性瓊脂 250
用于乳酸菌分離培養 APT Agar APT 瓊脂 250
用于雙歧桿菌分離培養 雙歧桿菌BS培養基 250
用于雙歧桿菌分離培養(GB標準) BL medium BL瓊脂培養基 250
用于雙歧桿菌分離培養(GB標準) BBL medium BBL瓊脂培養基 250
用于雙歧桿菌分離培養(GB標準) TPY medium TPY瓊脂培養基 250
用于雙歧桿菌增菌培養,使用時需加入氯化血紅素和維生素K1(GB標準) PYG Broth Base PYG 液體培養基基礎 250
用于單增李氏菌增菌培養(SN、GB標準) Trypticase Soy-Yeast Extract Broth 胰酪胨大豆酵母浸膏肉湯(TSB-YE) 250
每支添加于225ml HB4150、HB4192中(SN、GB標準) 萘啶酮酸 10mg/支*5
添加于225ml HB4160中制成LB1 4.5mg*5
添加于225ml HB4160中制成LB1 4.0mg*5
每支添加于225ml HB4150、HB4192中
精氨酸雙水解酶試驗用培養基(AD) 5
用于霍亂弧菌選擇性分離培養 Gentamycin Agar 慶大霉素瓊脂 250
用于霍亂弧菌選擇性分離培養,滅菌冷至50℃加入亞碲酸鉀,倒平板 No.4 Agar Base 四號瓊脂基礎 250
用于神奈川現象試驗(SN標準) Wagstsuma Agar Base 我妻氏培養基基礎 250
用于副溶血性弧菌的前增菌培養 60%/L NaCl Peptone Water 60%/L氯化鈉蛋白胨肉湯 250
用于副溶血性弧菌的生化反應篩選(SN標準) NaCl Triple Sugar Iron Agar 氯化鈉三糖鐵 250
培養副溶血性弧菌,做細胞色素氧化酶實驗(SN標準) Tryptic Soy Agar 胰胨大豆瓊脂斜面(TSA) 250
用于副溶血性弧菌42℃生長試驗 42℃growth Medium 42℃生長培養基 250
用于鑒別弧菌葡萄糖代謝類型(發酵型或氧化型)(SN標準) O/F Medium O/F培養基(HLGB) 250
用于副溶血性弧菌的選擇性增菌培養(GB標準) Sodium Chloride Violet purple Enrichment Broth 氯化鈉結晶紫增菌液 250
用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(GB標準) Sodium Chloride Sucrose Agar 氯化鈉蔗糖瓊脂 250
用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(GB標準) Halophilic Bacteria Selective Agar 嗜鹽菌選擇性瓊脂 250
用于副溶血性弧菌的溶血試驗 Sodium Chloride Blood Agar Base 氯化鈉血瓊脂基礎 250
用于霍亂弧菌的生化試驗(SN標準) 霍亂雙糖鐵瓊脂(KIA) 250
用于霍亂弧菌的培養(SN標準) T1N1 Agar T1N1 瓊脂 250
用于霍亂弧菌的生長試驗(SN標準) T1N0 Broth T1N0 肉湯 250
小鼠雜交瘤細胞;4D1用于霍亂弧菌的生長試驗(SN標準) T1N3 Broth T1N3 肉湯 250
用于霍亂弧菌的復合生化試驗(SN標準) Arginine Dextrose Agar 精氨酸葡萄糖斜面瓊脂 100
用于弧菌分離培養(FDA標準) mCPC Medium mCPC 培養基 250
每瓶添加于100ml mCPC培養基中 mCPC Me
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質粒或連接產物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養基(S.O.C.營養豐富,可提高轉化效率)。
4. 37℃,225 rpm復蘇60分鐘或30℃,225 rpm復蘇90分鐘。
(當質粒中含有不穩定片段時,30℃培養可降低錯誤重組的概率,若轉化control pUC19計算轉化效率,則需37℃,225 rpm復蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的S.O.C. 或LB培養基上。
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