詳細(xì)介紹
單克隆抗體、多克隆抗體、一抗、二抗;免疫組化抗體、免疫細(xì)胞化學(xué)抗體
產(chǎn)品名稱:磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體
英文名稱:Anti-phospho-APP(pTyr757)
產(chǎn)品編號(hào):A-01144
產(chǎn)品規(guī)格:0.1ml/0.2ml
品 牌:Abcam
公司名稱:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
目前,我司有多種抗體可供選擇,包括針對(duì)各種細(xì)胞因子、趨化因子、蛋白酶、生長因子、粘附因子、神經(jīng)營養(yǎng)因子、干細(xì)胞因子和發(fā)育蛋白的抗體,并且在不斷更新。
單克隆抗體的制備過程:
1)免疫脾細(xì)胞的制備 制備單克隆抗體的動(dòng)物多采用純系 Balb/c小鼠。免疫的方法取決于所用抗原的性質(zhì)。免疫方法同一般血清的制備,也可采用脾內(nèi)直接免疫法。
2)骨髓瘤細(xì)胞的培養(yǎng)與篩選 在融合前,骨髓瘤細(xì)胞應(yīng)經(jīng)過含8-AG的培養(yǎng)基篩選,防止細(xì)胞發(fā)生突變恢復(fù)HGPRT的活性(恢復(fù)HGPRT的活性的細(xì)胞不能在含8-AG的培養(yǎng)基中存活)。骨髓瘤細(xì)胞用10%小牛血清的培養(yǎng)液在細(xì)胞培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),融合前24h換液一次,使骨髓瘤細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長期。
3)細(xì)胞融合的關(guān)鍵: 1技術(shù)上的誤差常常導(dǎo)致融合的失敗。例如,供者淋巴細(xì)胞沒有查到免疫應(yīng)答。這必然要失敗的。
2融合試驗(yàn)zui大的失敗原因是污染,融合成功的關(guān)鍵是提供一個(gè)干凈的環(huán)境,以及適宜的無菌操作技術(shù)。
4)陽性克隆的篩選 應(yīng)盡早進(jìn)行。通常在融合后10天作*次檢測,過早容易出現(xiàn)假陽性。檢測方法應(yīng)靈敏、準(zhǔn)確、而且簡便快速。具體應(yīng)用的方法應(yīng)根據(jù)抗原的性質(zhì),以及所需單克隆抗體的功能進(jìn)行選擇。常用的方法有 RIA法、 ELISA法和免疫熒光法等。其中ELISA法zui簡便,RIA法zui準(zhǔn)確。陽性克隆的篩選應(yīng)進(jìn)行多次,均陽性時(shí)才確定為陽性克隆進(jìn)行擴(kuò)增。
5)克隆化 克隆化的目的是為了獲得單一細(xì)胞系的群體。克隆化應(yīng)盡早進(jìn)行并反復(fù)篩選。這是因?yàn)槌跗诘碾s交瘤細(xì)胞是不穩(wěn)定的,有丟失染色體的傾向。反復(fù)克隆化后可獲得穩(wěn)定的雜交瘤細(xì)胞株。
動(dòng)物免疫
細(xì)胞融合
克隆篩選
交雜瘤細(xì)胞的克隆化
腹水制備與單抗純化