NMY51 Chemically Competent Cell 產品說明書

產品規格

NMY51：                     10×100μl            保存條件：- 80℃

PGADT7（control vector）：10ng/μl    10μl            保存條件：  4℃

Carrier DNA：            5ug/μl   100 μl            保存條件：  4℃

PEG/LiAc ：                       5 ml            保存條件：  4℃

基因型

MATa his3Δ200 trp1-901 leu2-3,112 ade2 LYS2::(lexAop)4-HIS3 ura3::(lexAop)₈-lacZ ade2::(lexAop) ₈-ADE2 GAL4

產品說明

NMY51感受態細胞是Dualsystems 開發的膜系統酵母雙雜宿主菌,

經PGADT7質粒檢測轉化效率為10⁴cfu/μg DNA。

操作方法

1. 取100 μl冰上融化的NMY51感受態細胞，依次加入預冷的目的質粒1-5ug，Carrier DNA（95-100度5min快速冰浴，重復一次）10 ul ，PEG/liAC  500ul并吸打幾次混勻，30度水浴30 分鐘（15 min時翻轉6-8次混勻）。

2. 將管放42度水浴15min  （7.5 min時翻轉6-8次混勻）。  

3. 5000 rpm 離心 40s 棄上清，ddH2O 400ul 重懸，離心 30s 棄上清。                      

4. ddH2O 50ul重懸，涂板。

5. 28-30度 ，培養48-96小時。

注意事項

1. 感受態細胞在冰上融化。

2. 轉化高濃度的質粒可相應減少終用于涂板的菌量。

3. 同時轉化2-3種質粒時可增加質粒的用量。