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上海士鋒生物科技有限公司
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大腸桿菌轉化與感受態細胞的制備方法的研究進展

時間:2016-7-20閱讀:582
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大腸桿菌細胞表面沒有結合DNA的特異性受體存在,金屬離子誘導大腸桿菌攝取外源DNA具有一定的特異性。高濃度非生理條件下Ca2+誘導大腸桿菌攝取外源DNA,可能一方面是高濃度的Ca2+聚集在細胞表面改變了細胞壁的滲透性,使轉化DNA更容易接近細胞膜。另一方面少量Ca2+進入細胞與胞內的PHB和Pi結合成復合物,在細胞膜上形成新的膜通道,為DNAzui終進入細胞內提供了條件。低Ca2+誘導大腸桿菌攝取DNA可能主要是后者的作用。因此,Ca2+誘導大腸桿菌建立感受態并實現DNA轉化,既是一個物理化學過程,也是細胞自身生理調節的反應過程。這些研究結果對于我們探索大腸桿菌攝取外源DNA的分子機理,提高基因工程操作中將重組DNA導入受體細胞的效率,以及正確評估大腸桿菌可能發生的水平基因轉移事件具有重要意義。

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