一、實驗目的 
通過實驗，初步掌握動、植物染色體Ｃ帶分帶技術。 
二、實驗原理 
Ｃ帶是顯帶技術中zui簡單的一種帶型。使用這種技術，能使著絲粒型的異染色質著色，這種異染色質通常位于著絲粒周圍并常含有高度重復序列的DNA。因為通常都在著絲粒處出現，所以稱之為C-帶。 
關于產生Ｃ帶的機理，有人認為用氫氧化鋇和鹽類處理染色體，能從染色體中提取高達80％的DNA。DNA被優先地從非Ｃ帶區提出，結果染色體臂著色淺而著絲粒異染色質著色深。有人研究表明，著絲粒異染色質僅與組蛋白結合，而常染色質含有大量非組蛋白蛋白質。一般有這樣的看法，活躍的染色質比遺傳上不活躍的染色質更富以非組蛋白蛋白質。這說明，僅與組蛋白結合的染色質比含有大量非組蛋白蛋白質的染色質，結構緊密得多。也就是這種緊密的結構保護著絲粒的異染色質免受氫氧化鋇和鹽類的破壞，從而產生Ｃ帶。 
三、實驗材料 
小白鼠骨髓細胞染色體制片不經染色留用的標本片，或采用酸處理壓片法制備植物根尖細胞染色體的標本片。 
四、實驗器具和藥品試劑 
顯微鏡、恒溫水浴鍋、分析天平、鑷子、切片架、切片盒、立式染缸、漏斗、量筒、吸管、濾紙等。 
鹽酸、氫氧化鋇、Giemsa母液、磷酸緩沖液、2×SSC溶液。 
五、實驗方法和步驟 
(一) BSG(Barium hydroxide， Saline，Giemsa)法： 
將標本片浸入新配制的5％Ba(OH)2溶液(60℃)中處理5～10分鐘后，用 60℃熱水慢慢倒入染色缸中，使氫氧化鋇慢慢溢出，直到Ba(OH)2被熱水置換出來，zui后再用熱水漂洗2次，以*洗凈氫氧化鋇。或經0.2N HCL 漂洗數秒，用蒸餾水漂洗干凈。然后在2×SSC溶液（65℃）中溫浴 60～120分鐘。經水洗, 稍干后用1/10 Giemsa 染液染色20分鐘。流水洗片，稍干后鏡檢。 
(二) HSG(Hyolorochloric acid， Saline， Giemsa)法： 
將標本片在0.2N HCL中室溫處理60分鐘。蒸餾水沖洗后，置2×SSC溶液(65℃)中溫育15分鐘。經蒸餾水沖洗，稍干后用1/10 Giemsa 染液染色 10分鐘左右。水沖洗，稍干后鏡檢。 
(三) 注意事項 
分帶處理適度的染色體應為深紅略帶藍色,具黑色帶紋。如染色體紅色，無帶，則變性處理不夠，應加大Ba(OH)2濃度或加長變性時間；如染色體未染上色，或只著絲點附近染成黑色，則變性過度，應降低Ba(OH)2濃度，或減少變性時間；如細胞核和染色體均不見，說明變性極過度。 
蠶豆和洋蔥采用HSG法較好，而大麥和小麥采用BSG法效果較好。 
(四) 帶型分析 將已分帶的標本，進行顯微攝影，沖洗、放大，按核型分析方法將染色體編號進行帶型分析，要求詳細記錄各染色體上，各帶紋的位置，寬窄著色深淺和形狀。zui后繪制染色體模式圖，在各條染色體模式圖上標出各條帶紋的位置、寬窄、深淺、形狀等線條。 
植物染色體C帶主要包括四種帶型： 
1．著絲粒帶 是指著絲粒及其附近的帶，大部分植物都有這種帶型。 
2．中間帶 分布于染色體著絲粒至末端之間的帶叫做中間帶。小麥B組染色體中間帶較多且明顯；蠶豆染色體中間帶一般在長臂上。 
3．末端帶 位于染色體的末端的帶。洋蔥有較明顯的末端帶，小麥僅部分染色體顯示，大麥、蠶豆則不顯示。 
4．核仁縊痕帶 是指核仁染色體特殊的帶型，位于核仁組織中心區，蠶豆、玉米、大麥、小麥均有明顯的核仁縊痕帶。