葡聚糖凝LH-20詳細說明
中文名:葡聚糖凝LH-20
中文別名:交聯葡聚糖凝膠LH-20;交聯右旋糖酐凝膠LH-20
英文名稱:Sephadex LH-20;Cross-inked dextran gel LH-20
供應商:上海遠慕
結構成分:交聯右旋糖酐
排阻極限:4~5KD(與所用溶劑有關)
顆粒直徑:18~111um
球蛋白分離范圍:100~4000
PH穩定性:2~11
操作溫度:4~40℃
性狀:白色珠?;蚍勰?屬親脂性凝膠。是由葡聚糖G-25羥丙基化加工而成,屬于分子篩凝膠
用途:適用于凝膠過濾,天然產物在有機溶劑中的純化。
保存:RT
葡聚糖凝LH-20說明:
本品適合用于有機溶劑分離嗜脂性分子,天然產物在有機溶劑中的純化。可以非常經濟的大規模制備各種天然產物,尤其在中藥有效成分提取中作為大孔吸附樹脂解析物的純化。
結合凝膠過濾﹑分配色譜及吸附層析于一身,能分離結構相近的分子。因此使用中要考略幾種色譜的作用機制。
zui高載量可達250mg樣品/ml凝膠﹑極少需要再生﹑使用得當,分離效果可保持不變。上樣量視被分離物的結構性能的差異而定:差異大,則大;差異小,則小。凝膠過濾的上樣量一般為5-7%的床體積,我們建議初次上樣量控制在1-2%的床體積,視分離情況可以逐步增加;柱高的選擇也與分離要求相關――難分物質要有一定柱高和流速控制;流動相可參考TLC的條件,正確的流動相可以提高分離度并縮短分離時間。
葡聚糖凝LH-20特點:
1、適合用有機溶劑分離嗜脂性分子,可以非常經濟地大規模制備各種天然產物
2、結合凝膠過濾、分配色譜及吸附性層析于一身,分離結構非常相近的分子
3、載量可高達300mg樣品/ml凝膠,極少需要再生,分離效果可保持十幾年不變。
葡聚糖凝膠 LH-20原理:
1.葡聚糖凝膠 LH-20的分離原理主要有兩方面:以凝膠過濾作用為主,兼具反相分配的作用(在反相溶劑中)。因為凝膠過濾作用,所以大分子的化合物保留弱,先被洗脫下來,小分子的化合物保留強,zui后出柱。
2.如果使用反相溶劑洗脫, Sephadex LH-20對化合物還起反相分配的作用,所以極性大的化合物保留弱,先被洗脫下來,極性小的化合物保留強,后出柱。
3.如果使用正相溶劑洗脫,這主要靠凝膠過濾作用來分離。
1. 選擇條件:
梯度洗脫在葡聚糖凝膠 LH-20使用中并不象在正相柱層析中那么重要。首先你的樣品須要能溶解在盡量少量的洗脫劑中。極性大的用甲醇水系統;極性小者一般用不含水的系統。我們實驗室常用正己烷二氯甲烷甲醇系統,用了很多年,效果較好。
2. 飽和層析柱:
用洗脫劑將凝膠搖勻,直立柱身,讓其自然沉降,此時要防止氣泡留在其中。至少半小時打開開關,流出幾個柱體種的洗脫劑,目的是使其膨脹在正確比例的洗脫劑中。
3. 樣品處理:
用盡量少的洗脫劑溶解樣品,常壓過濾。
4. 濕法上柱:
這也是要有技巧的步驟。
5. 洗脫:
控制流速,一般1drop/s以下,可參見廠家的一些參數;必要時更改極性(很多時一個極性就可以將樣品洗脫完畢)。再生以備下次使用。
標簽:葡聚糖凝膠 LH-20,葡聚糖凝膠
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