小 鼠 三 磷 酸 肌 醇 ( I P 3 ) 酶 聯 免 疫 試 劑 盒 使 用 說 明 書
本 試 劑 盒 僅 供 研 究 使 用 。
檢 測 范 圍 檢 測 范 圍 檢 測 范 圍 檢 測 范 圍 ： ： ： ： 9 6 T
1 . 2 n g / m l - 4 5 n g / m l
使 用 目 的 使 用 目 的 使 用 目 的 使 用 目 的 ： ： ： ：
本 試 劑 盒 用 于 測 定 小 鼠 血 清 、 血 漿 及 相 關 液 體 樣 本 中 三 磷 酸 肌 醇 ( I P 3 ) 含 量 。
實 驗 原 理 實 驗 原 理 實 驗 原 理 實 驗 原 理
本 試 劑 盒 應 用 雙 抗 體 夾 心 法 測 定 標 本 中 小 鼠 三 磷 酸 肌 醇 ( I P 3 ) 水 平 。 用 純 化 的 小 鼠 三 磷
酸 肌 醇 ( I P 3 ) 抗 體 包 被 微 孔 板 ， 制 成 固 相 抗 體 ， 往 包 被 單 抗 的 微 孔 中 依 次 加 入 三 磷 酸 肌 醇
( I P 3 ) ， 再 與 H R P 標 記 的 三 磷 酸 肌 醇 ( I P 3 ) 抗 體 結 合 ， 形 成 抗 體 - 抗 原 - 酶 標 抗 體 復 合 物 ， 經 過
徹 底 洗 滌 后 加 底 物 T M B 顯 色 。 T M B 在 H R P 酶 的 催 化 下 轉 化 成 藍 色 ， 并 在 酸 的 作 用 下 轉 化
成 zui 終 的 黃 色 。 顏 色 的 深 淺 和 樣 品 中 的 三 磷 酸 肌 醇 ( I P 3 ) 呈 正 相 關 。 用 酶 標 儀 在 4 5 0 n m 波 長
下 測 定 吸 光 度 （ O D 值 ） ， 通 過 標 準 曲 線 計 算 樣 品 中 小 鼠 三 磷 酸 肌 醇 ( I P 3 ) 濃 度 。
試 劑 盒 組 成 試 劑 盒 組 成 試 劑 盒 組 成 試 劑 盒 組 成
1 3 0 倍 濃 縮 洗 滌 液 2 0 m l × 1 瓶 7 終 止 液 6 m l × 1 瓶
2 酶 標 試 劑 6 m l × 1 瓶 8 標 準 品 （ 8 0 n g / m l ） 0 . 5 m l × 1 瓶
3 酶 標 包 被 板 1 2 孔 × 8 條 9 標 準 品 稀 釋 液 1 . 5 m l × 1 瓶
4 樣 品 稀 釋 液 6 m l × 1 瓶 1 0 說 明 書 1 份
5 顯 色 劑 A 液 6 m l × 1 瓶 1 1 封 板 膜 2 張
6 顯 色 劑 B 液 6 m l × 1 / 瓶 1 2 密 封 袋 1 個
標 本 標 本 標 本 標 本 要 求 要 求 要 求 要 求
1 ． 標 本 采 集 后 盡 早 進 行 提 取 ， 提 取 按 相 關 文 獻 進 行 ， 提 取 后 應 盡 快 進 行 實 驗 。 若 不 能
馬 上 進 行 試 驗 ， 可 將 標 本 放 于 - 2 0 ℃ 保 存 ， 但 應 避 免 反 復 凍 融
2 ． 不 能 檢 測 含 N a N 3 的 樣 品 ， 因 N a N 3 抑 制 辣 根 過 氧 化 物 酶 的 （ H R P ） 活 性 。
操 作 步 驟 操 作 步 驟 操 作 步 驟 操 作 步 驟
1 . 標 準 品 的 稀 釋 ： 本 試 劑 盒 提 供 原 倍 標 準 品 一 支 ， 用 戶 可 按 照 下 列 圖 表 在 小 試 管 中 進 行 稀
釋 。
4 0 n g / m l 5 號 標 準 品 1 5 0 μ l 的 原 倍 標 準 品 加 入 1 5 0 μ l 標 準 品 稀 釋 液
2 0 n g / m l 4 號 標 準 品 1 5 0 μ l 的 5 號 標 準 品 加 入 1 5 0 μ l 標 準 品 稀 釋 液
1 0 n g / m l 3 號 標 準 品 1 5 0 μ l 的 4 號 標 準 品 加 入 1 5 0 μ l 標 準 品 稀 釋 液
5 n g / m l 2 號 標 準 品 1 5 0 μ l 的 3 號 標 準 品 加 入 1 5 0 μ l 標 準 品 稀 釋 液
2 . 5 n g / m l 1 號 標 準 品 1 5 0 μ l 的 2 號 標 準 品 加 入 1 5 0 μ l 標 準 品 稀 釋 液
2 . 加 樣 ： 分 別 設 空 白 孔 （ 空 白 對 照 孔 不 加 樣 品 及 酶 標 試 劑 ， 其 余 各 步 操 作 相 同 ） 、 標 準 孔 、
待 測 樣 品 孔 。 在 酶 標 包 被 板 上 標 準 品 準 確 加 樣 5 0 μ l ， 待 測 樣 品 孔 中 先 加 樣 品 稀 釋 液 4 0 μ l ，
