細胞株檢測方法雙抗體夾心法
雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法，操作步驟如下： 雙抗體夾心法
一、將特異性抗體與固相載體連接，形成固相抗體：洗滌除去未結合的抗體及雜質。
二、加受檢標本：使之與固相抗體接觸反應一段時間，讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結合，形成固相抗原復合物。洗滌除去其他未結合的物質。
三、加酶標抗體：使固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。*洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質的量正相關。
四、加底物：夾心式復合物中的酶催化底物成為有色產物。根據顏色反應的程度進行該抗原的定性或定量。
根據同樣原理，將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標抗原結合物，即可用雙抗原夾心法測定標本中的抗體。
在臨床檢驗中，此法適用于檢驗各種蛋白質等大分子抗原，例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要獲得針對受檢抗原的異性抗體，就可用于包被固相載體和制備酶結合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清，包被和酶標用的抗體分別取自不同種屬的動物。如應用單克隆抗體，一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗，分別用于包被固相載體和制備酶結合物。這種雙位點夾心法具有很高的特異性，而且可以將受檢標本和酶標抗體一起保溫反應，作一步法檢測。
在一步法測定中，當標本中受檢抗原的含量很高時，過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結合，而不再形成"夾心復合物"。類同于沉淀反應中抗原過剩的后帶現象，此時反應后顯色的吸光值（位于抗原過剩帶上）與標準曲線（位于抗體過剩帶上）某一抗原濃度的吸光值相同，如按常法測讀，所得結果將低于實際的含量，這種現象被稱為鉤狀效應（hook effect），因為標準曲線到達高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應嚴重時，反應甚至可不顯色而出現假陰性結果。因此在使用一步法試劑測定標本中含量可異常增高的物質（例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等）時，應注意可測范圍的zui高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應。
假使在被測分子的不同位點上含有多個相同的決定簇，例如HBsAg的a決定簇，也可用針對此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結合物。但在HBsAg的檢測中應注意亞型問題，HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4個亞型，顯然每種亞型均有相同的a決定簇的反應性，這也是用單抗作夾心法應注意的問題。
雙抗體夾心法測抗原的另一注意點是類風濕因子（RF）的干擾。RF是一種自身抗體，多為IgM型，能和多種動物IgG的Fc段結合。用作雙抗體夾心法檢測的血清標本中如含有RF，它可充當抗原成份，同時與固相抗體和酶標抗體結合，表現出假陽性反應。采用F（ab'）或Fab片段作酶結合物的試劑，由于去除了Fc段，從而可消除RF的干擾。雙抗體夾心法ELISA試劑是否受RF的影響，已被列為這類試劑的一項考核指標
雙抗體夾心法適用于測定二價或二價以上的大分子抗原，但不適用于測定半抗原及小分子單價抗原，因其不能形成兩位點夾心。
細胞株HNPC 人髓核細胞 5 x 10^5 cells/vial
HAFC 人纖維環細胞 5 x 10^5 cells/vial
HHSEC 人肝竇內皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
HIBEpiC 人肝內膽管上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
HH 人肝細胞 1 x 10^6 cells/vial
HHSteC 人肝星形細胞 5 x 10^5 cells/vial
HSEC 人脾臟內皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
HSF 人脾臟成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
HCMEC 人心臟微血管內皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
HCAEC 人冠狀動脈內皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
HAEC 人主動脈內皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
HASMC 人主動脈平滑肌細胞 5 x 10^5 cells/vial
HAF 人主動脈成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
HCM 人心肌細胞 5 x 10^5 cells/vial
HCM-a 人心肌細胞-成人 5 x 10^5 cells/vial
HCF 人心臟成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
HCF-av 人心臟成纖維細胞-成人心室 5 x 10^5 cells/vial
HCF-aa 人心臟成纖維細胞-成人心房 5 x 10^5 cells/vial
HCEpiC 人角膜上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
HK 人角膜細胞 5 x 10^5 cells/vial
HREC 人視網膜內皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
HRPEpiC 人視網膜色素上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
HLEpiC 人晶狀體上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
HIPEpiC 人虹膜色素上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
HConF 人結膜成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
HNPCEpiC 人無色素睫狀上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
HTMC 人小梁網細胞 5 x 10^5 cells/vial
HOCF 人眼球脈絡膜成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
HConEC 人結膜上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
HVCEC 人絨毛膜毛細血管內皮細胞 1 x 10^6 cells/vial
HAmEpiC 人羊膜上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
HVT 人絨毛膜滋養層細胞 1 x 10^6 cells/vial
HVMF 人絨毛間充質成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
HAMSC 人羊膜間充質基質細胞 5 x 10^5 cells/vial
HCMSC 人絨毛膜間充質基質細胞 5 x 10^5 cells/vial
HAMEC 人脂肪微血管內皮細胞 1 x 10^6 cells/vial
HPA-v 人前脂肪細胞-內臟 1 x 10^6 cells/vial
HPA-s 人前脂肪細胞-皮下 1 x 10^6 cells/vial
HOMEC 人卵巢微血管內皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
HOSEpiC 人卵巢表層上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
HOF 人卵巢成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
HAMSC 人羊膜間充質基質細胞 5 x 10^5 cells/vial
HCMSC 人絨毛膜間充質基質細胞 5 x 10^5 cells/vial
HMSC-bm 人骨髓間充質干細胞 5 x 10^5 cells/vial
HMSC-ad 人脂肪間充質干細胞 5 x 10^5 cells/vial
HMSC-hp 人肝臟間充質干細胞 5 x 10^5 cells/vial
HUMSC 人臍帶間充質干細胞 5 x 10^5 cells/vial
HPMSC 人肺間充質干細胞 5 x 10^5 cells/vial
HVMSC 人脊柱間充質干細胞 5 x 10^5 cells/vial細胞株
