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原代細胞操作方法說明書

閱讀:207發布時間:2017-7-24

原代細胞操作方法
實驗開始前,請提前配置好所有試劑,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加*標記抗體工作液 100μl(取1μl*標記抗體加99μl*標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同*標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。
原代細胞HDF-a cDNA    人成纖維細胞-成人cDNA    20 reactions
HHGMC cDNA    人生發基質細胞cDNA    20 reactions
HLEC cDNA    人淋巴內皮細胞cDNA    20 reactions
HLF cDNA    人淋巴成纖維細胞cDNA    20 reactions
HOK cDNA    人口腔角質細胞cDNA    20 reactions
HGF cDNA    人牙齦成纖維細胞cDNA    20 reactions
HPLF cDNA    人牙周膜成纖維細胞cDNA    20 reactions
HEEpiC cDNA    人食道上皮細胞cDNA    20 reactions
HESMC cDNA    人食道平滑肌細胞cDNA    20 reactions
HIMEC cDNA    人腸微血管內皮細胞cDNA    20 reactions
HISMC cDNA    人腸平滑肌細胞cDNA    20 reactions
HCSMC cDNA    人結腸平滑肌細胞cDNA    20 reactions
HPMEC cDNA    人肺微血管內皮細胞cDNA    20 reactions
HPAEC cDNA    人肺動脈內皮細胞cDNA    20 reactions
HPASMC cDNA    人肺動脈平滑肌細胞cDNA    20 reactions
HPAF cDNA    人肺動脈成纖維細胞cDNA    20 reactions
HPAEpiC cDNA    人肺泡上皮細胞cDNA    20 reactions
HBEpiC cDNA    人支氣管上皮細胞cDNA    20 reactions
HTEpiC cDNA    人氣管上皮細胞cDNA    20 reactions
HSAEpiC cDNA    人小氣道上皮細胞cDNA    20 reactions
HPF cDNA    人肺成纖維細胞cDNA    20 reactions
HBSMC cDNA    人支氣管平滑肌細胞cDNA    20 reactions
HTSMC cDNA    人氣管平滑肌細胞cDNA    20 reactions
HSkMC cDNA    人骨骼肌細胞cDNA    20 reactions
HSkMSC cDNA    人骨骼肌衛星細胞cDNA    20 reactions
HSkMM cDNA    人骨骼肌成肌細胞cDNA    20 reactions
HRGEC cDNA    人腎小球內皮細胞cDNA    20 reactions
HRPTEpiC cDNA    人腎近曲小管上皮細胞cDNA    20 reactions
HRCEpiC cDNA    人腎皮質上皮細胞cDNA    20 reactions
HREpiC cDNA    人腎上皮細胞cDNA    20 reactions
HRMC cDNA    人腎系膜細胞cDNA    20 reactions
HBdSMC cDNA    人膀胱平滑肌細胞cDNA    20 reactions
HUC cDNA    人尿道上皮細胞cDNA    20 reactions
HBdSF cDNA    人膀胱基質成纖維細胞cDNA    20 reactions
HPEpiC cDNA    人前列腺上皮細胞cDNA    20 reactions
HPrF cDNA    人前列腺成纖維細胞cDNA    20 reactions
HPSMC cDNA    人前列腺平滑肌細胞cDNA    20 reactions
HCO cDNA    人顱骨造骨細胞cDNA    20 reactions
HS cDNA    人滑膜細胞cDNA    20 reactions
HNPC cDNA    人髓核細胞cDNA    20 reactions
HHSEC cDNA    人肝竇內皮細胞cDNA    20 reactions
HIBEpiC cDNA    人肝內膽管上皮細胞cDNA    20 reactions原代細胞

 


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