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原代細胞雙抗體夾心法

閱讀:230發布時間:2017-8-14

原代細胞雙抗體夾心法
其中包括: 
(1)固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。酶聯免疫試劑盒不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。 
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,酶聯免疫試劑盒時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)酶聯免疫ELISA試劑盒進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。
的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。
原代細胞HUVEC cDNA    人臍靜脈內皮細胞cDNA    20 reactions
HUAEC cDNA    人臍動脈內皮細胞cDNA    20 reactions
HUVSMC cDNA    人臍靜脈平滑肌細胞cDNA    20 reactions
HUASMC cDNA    人臍動脈平滑肌細胞cDNA    20 reactions
HBMEC tRNA    人腦微血管內皮細胞總RNA    10 µg
HBVSMC tDNA    人腦血管平滑肌細胞總RNA    10 µg
HBVC tRNA    人腦血管周細胞總RNA    10 µg
HCPEC tRNA    人脈絡叢內皮細胞總RNA    10 µg
HCPEpiC tRNA    人脈絡叢上皮細胞總RNA    10 µg
HCPF tRNA    人脈絡叢成纖維細胞總RNA    10 µg
HMC tRNA    人腦膜細胞總RNA    10 µg
HN tRNA    人神經元總RNA    10 µg
HCGC tRNA    人小腦顆粒細胞總RNA    10 µg
HN-h tRNA    人海馬趾神經細胞總RNA    10 µg
HOPC tRNA    人少突膠質前體細胞總RNA    10 µg
HOPC-os tRNA    人少突膠質前體細胞(懸浮生長)總RNA    10 µg
HSC tRNA    人雪旺細胞總RNA    10 µg
HPC tRNA    人神經束膜細胞總RNA    10 µg
HA tRNA    人星形膠質細胞總RNA    10 µg
HA-c tRNA    人小腦星形膠質細胞總RNA    10 µg
HA-sp tRNA    人脊髓星形膠質細胞總RNA    10 µg
HA-h tRNA    人海馬趾星形膠質細胞總RNA    10 µg
HM tRNA    人小膠質細胞總RNA    10 µg
HDMEC tRNA    人微血管內皮細胞總RNA    10 µg
HDLEC tRNA    人淋巴內皮細胞總RNA    10 µg
HEK tRNA    人表皮角質細胞總RNA    10 µg
HEK-a tRNA    人表皮角質細胞-成人總RNA    10 µg
HEM-l tRNA    人表皮黑色素細胞-淺色素總RNA    10 µg
HEM-m tRNA    人表皮黑色素細胞-中色素總RNA    10 µg
HEM-d tRNA    人表皮黑色素細胞-深色素總RNA    10 µg
HDF-f tRNA    人成纖維細胞-胎兒總RNA    10 µg
HDF-n tRNA    人成纖維細胞-新生兒總RNA    10 µg
HDF-a tRNA    人成纖維細胞-成人總RNA    10 µg
HHGMC tRNA    人生發基質細胞總RNA    10 µg原代細胞

 


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