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干細胞操作要點

閱讀:285發(fā)布時間:2017-9-13

干細胞操作要點
1.仔細閱讀說明書,確定胰島素ELISA試劑盒在有效期內(nèi)。按說明書確定所有試劑齊全,以及所有實驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等。
2.標本制備要規(guī)范,每份標本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實驗者,注意低溫保存。
3.按胰島素ELISA試劑盒說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑。
4.選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對。若選擇兩個單抗,必須識別不同表位的抗體,從同一家公司選擇抗體。
5.一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml??衫脴藴实腅lsia操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
雖然酶活性調(diào)節(jié)ELISA方法的靈敏度目前并不十分理想,但在酶活性放大ELISA中,檢測的靈敏度遠比RIA高。根據(jù)質(zhì)量作用定律。即免疫反應(yīng)所形成的免疫復(fù)合物量與反應(yīng)物濃度成正比。推測所檢測的待測物分子數(shù)為1。已知1個摩爾濃度含6.02×1023個分子,那么理論推測酶活性放大ELISA方法的zui低檢測限可達1.7×10-24mol/L。
雖然在實際應(yīng)用中由于反應(yīng)條件和試劑純度以及儀器精度等因素的影響,往往達不到這個水平(大于104個分子),但表明ELISA在靈敏度方面的改進潛力是很大的。
干細胞HLF cDNA    人淋巴成纖維細胞cDNA    20 reactions
HOK cDNA    人口腔角質(zhì)細胞cDNA    20 reactions
HGF cDNA    人牙齦成纖維細胞cDNA    20 reactions
HPLF cDNA    人牙周膜成纖維細胞cDNA    20 reactions
HEEpiC cDNA    人食道上皮細胞cDNA    20 reactions
HESMC cDNA    人食道平滑肌細胞cDNA    20 reactions
HIMEC cDNA    人腸微血管內(nèi)皮細胞cDNA    20 reactions
HISMC cDNA    人腸平滑肌細胞cDNA    20 reactions
HCSMC cDNA    人結(jié)腸平滑肌細胞cDNA    20 reactions
HPMEC cDNA    人肺微血管內(nèi)皮細胞cDNA    20 reactions
HPAEC cDNA    人肺動脈內(nèi)皮細胞cDNA    20 reactions
HPASMC cDNA    人肺動脈平滑肌細胞cDNA    20 reactions
HPAF cDNA    人肺動脈成纖維細胞cDNA    20 reactions
HPAEpiC cDNA    人肺泡上皮細胞cDNA    20 reactions
HBEpiC cDNA    人支氣管上皮細胞cDNA    20 reactions
HTEpiC cDNA    人氣管上皮細胞cDNA    20 reactions
HSAEpiC cDNA    人小氣道上皮細胞cDNA    20 reactions
HPF cDNA    人肺成纖維細胞cDNA    20 reactions
HBSMC cDNA    人支氣管平滑肌細胞cDNA    20 reactions干細胞

 


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