原代細胞實驗中過失的方法：
1、檢驗技師應(yīng)具備從事實驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗。
2、操作前仔細閱讀說明書，嚴格按照說明書要求進行規(guī)范化操作。
3、評估試劑盒的實用性，試劑盒的穩(wěn)定與否，對準確率的高低很重要。
4、加樣要準確、快速。
5、使用校對過的微量移液器，排除自然誤差。
6、嚴格掌握顯色時間，顯色時間過短，加入終止液反應(yīng)終止后，底物結(jié)合物的量過少，易出現(xiàn)假陰性。
7、洗滌*，洗板不*，酶結(jié)合物本底顯色會呈現(xiàn)假陽性。
8、嚴控反應(yīng)時間，反應(yīng)時間過長，酶失活，反應(yīng)時間過短，酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合，生成物結(jié)構(gòu)松散不牢固，容易洗掉，都可能造成假陰性。
實驗過程必知小知識：
① 建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測，取平均值，以減小實驗誤差。
② 若顯色過淺，可適當延長底物溫育時。
③ 實驗嚴格按照說明書的操作進行，實驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
④ 酶標包被板開封后如未用完，應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
⑤ 標本宜在新鮮時檢測，如有細菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)，保存過久可發(fā)生聚合在ELISA中可使本底加深。
⑥ 凍結(jié)標本溶解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛混合，不要在混勻器上強烈震蕩。
⑦ 渾濁或有沉淀的標本應(yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測。
⑧ 反復(fù)凍融會使蛋白效價降低，所以代測樣本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。
原代細胞HK tRNA 人角膜細胞總RNA 10 µg
HRPEpiC tRNA 人視網(wǎng)膜色素上皮細胞總RNA 10 µg
HLEpiC tRNA 人晶狀體上皮細胞總RNA 10 µg
HIPEpiC tRNA 人虹膜色素上皮細胞總RNA 10 µg
HConF tRNA 人結(jié)膜成纖維細胞總RNA 10 µg
HNPCEpiC tRNA 人無色素睫狀上皮細胞總RNA 10 µg
HTMC tRNA 人小梁網(wǎng)細胞總RNA 10 µg
HAmEpiC tRNA 人羊膜上皮細胞總RNA 10 µg
HVT tRNA 人滋養(yǎng)層絨毛細胞總RNA 10 µg
HVMF tRNA 人絨毛間葉成纖維細胞總RNA 10 µg
HPA-v tRNA 人前脂肪細胞-內(nèi)臟總RNA 10 µg
HPA-s tRNA 人前脂肪細胞-皮下總RNA 10 µg
HMSC-bm tRNA 人間充質(zhì)干細胞-骨髓總RNA 10 µg
HMSC-ad tRNA 人間充質(zhì)干細胞-脂肪總RNA 10 µg
HMSC-hp tRNA 人間充質(zhì)干細胞-肝臟總RNA 10 µg
HUMSC tRNA 人臍帶間充質(zhì)干細胞總RNA 10 µg
HPMSC tRNA 人肺間充質(zhì)干細胞總RNA 10 µg
HMEpiC tRNA 人上皮細胞總RNA 10 µg
HMF tRNA 人成纖維細胞總RNA 10 µg
HUVEC tRNA 人臍靜脈內(nèi)皮細胞總RNA 10 µg
HUAEC tRNA 人臍動脈內(nèi)皮細胞總RNA 10 µg
HUVSMC tRNA 人臍靜脈平滑肌細胞總RNA 10 µg
HUASMC tRNA 人臍動脈平滑肌細胞總RNA 10 µg
HBMEC miRNA 人腦微血管內(nèi)皮細胞微小RNA 1 µg
HBCSMC miRNA 人腦血管平滑肌細胞微小RNA 1 µg
HBVP miRNA 人腦血管周細胞微小RNA 1 µg原代細胞
