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上海邦景實業(yè)有限公司
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閱讀:236發(fā)布時間:2017-3-2
人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件,是進行細胞培養(yǎng)的*步,若取材不當,將會直接影響細胞的體外培養(yǎng),現(xiàn)將取材的基本要求和注意事項敘述如下:
一、取材的基本要求
(1)取材要注意新鮮和保鮮 新鮮組織易于培養(yǎng)成功,取材時應(yīng)盡量在4~6h內(nèi)能制作成細胞,盡快入箱培養(yǎng),若不能即時培養(yǎng),應(yīng)將組織浸泡于培養(yǎng)液內(nèi),于4℃存放。若組織塊較大,應(yīng)在清除表面壞死組織、脂肪和結(jié)締組織后,切碎于培養(yǎng)液內(nèi)4℃存放,但時間不能超過24h。對于已切碎的組織或血液、淋巴組織應(yīng)加入含10%二甲基亞砜的培養(yǎng)基,按細胞凍存方式于液氮中冷凍保存。
(2)取材應(yīng)嚴格無菌 所取標本材料應(yīng)在無菌條件下進行,為了確保無菌,對所取材料若疑有污染的可能,應(yīng)將所取組織在含高濃度抗菌素(400單位/mL)甚至加入適量的*或10%*液的培養(yǎng)液內(nèi)于4℃下存放2小時以上,再用PBS洗2~3次,以確保所取材料無菌。要用無菌包裝的器皿或事先消毒好的帶少許培養(yǎng)液(內(nèi)含400單位/mL抗菌素)的小瓶等便于攜帶的物品來取材,所取材料應(yīng)避免接觸有毒有害的化學(xué)物質(zhì),如碘、汞等。
(3)取材和原代細胞制作時,要用鋒利的器械,如*或剃須刀片切碎組織,盡可能減少對細胞的機械損傷。
(4)要仔細去除所取材料上的血液、脂肪、壞死組織及結(jié)締組織,切碎組織時應(yīng)避免組織干燥,可在含少量培養(yǎng)液的器皿中進行。
(5)取材應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等,一般來講,胚胎組織較成熟個體組織容易培養(yǎng),分化低的較分化高的組織容易生長,腫瘤組織較正常組織容易培養(yǎng)。取材時應(yīng)盡量選用易培養(yǎng)的組織進行培養(yǎng)。
(6)原代細胞取材時要同時留好組織學(xué)標本和電鏡標本。對組織的來源、部位、包括供體的一般情況要做詳細的記錄,以備以后查詢。
我公司供應(yīng)各種細胞株/細胞系,本公司所有產(chǎn)品僅用于科研用途。
普通細胞株貨期2周左右,具體視細胞生長情況而定,冬季或天氣寒冷地區(qū)可以發(fā)凍存細胞,需另加干冰及運費。
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原代細胞
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