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上海邦景實業(yè)有限公司
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所 在 地上海市
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更新時間：2017-01-19 13:48:20瀏覽次數(shù)：236次
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MgSO4溶液，10mM，PCR 級5mL實驗步驟運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。
MgSO4溶液，10mM，PCR 級5mL實驗步驟合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
MgSO4溶液，10mM，PCR 級5mL實驗步驟按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機引物，將出現(xiàn)多個小片段）。
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提 供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
乳酸過氧化物酶 JC-1
α- * JC-10
羧甲基纖維素鈉鹽 Lucigenin( 光澤精 )
糊精 Lyso-Tracker Red( 溶酶體紅色熒光探針 )
葡聚糖 T-10 MEQ，(6- 甲氧 -N- 乙基喹啉碘 )
葡聚糖 T-40 Mito-Tracker Green( 線粒體綠色熒光探針 )
葡聚糖 T-70 MM1-43(FM®1-43)
葡聚糖 T-500 MM4-64(FM®4-64)
葡聚糖 T-2000 Monobromobimane [mBBR]
葡聚糖 MQAE( 氯離子熒光探針 )
透明質(zhì)酸 NAO
甲基纖維素 NBD-Cl
吐溫 -20 Nile Red
吐溫 -80 Quin-2AM
吐溫 -60 Rhod-2，三鈉鹽
糖原Ⅱ型 Rhodamine123
糖原Ⅲ型 SPQ(6- 甲氧基 -N-(3- 磺丙基 ) 喹啉 )
衛(wèi)矛醇
〖英文名稱〗：Dulcitol；Galactitol；Euonymit；Melampyrite；Melampyrin
〖其他名稱〗：甜醇；衛(wèi)茅醇；半乳糖醇；己六醇
〖CAS號〗：608-66-2
C6H14O6=182.17
〖級別〗：BR
〖含量〗：≥98.0%
〖熔點〗：185～189℃
〖重金屬〗：≤10ppm
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：白色結(jié)晶性粉末或單斜柱狀結(jié)晶，味微甜。農(nóng)作物提取，1g溶于2ml沸水、30ml冷水，微溶于乙醇。〖相對密度〗(d20)1.47。沸點 275～280℃(0.13kPa)。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)微生物學(xué)和生物化學(xué)研究
〖保存〗：RT
赤蘚糖醇
〖英文名稱〗：Erythritol；meso-Erythritol；1,2,3,4-Butanetetrol；meso-1,2,3,4-Tetrahydroxybutane
〖其他名稱〗：赤蘚醇；赤丁四醇；原藻醇；赤絲醇；(R,S)-1,2,3,4-丁四醇；赤絲草醇；內(nèi)消旋赤蘚糖醇
〖CAS號〗：149-32-6
C4H10O4=122.12
〖級別〗：BR
〖含量〗：≥99.0%
〖干燥失重〗：≤0.2%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：白色四方棱形結(jié)晶。沸點329-331℃，294-296℃（26.7kPa），〖相對密度〗1.45。極易溶于水(飽和溶液約61克溶于100克)，溶于吡啶(飽和溶液2.5%)，微溶于醇，幾乎不溶于醚。比蔗糖甜二倍
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)病理病毒研究
〖保存〗：RT，嚴(yán)防接觸皮膚和眼睛
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