真菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提 供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
真菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次實(shí)驗(yàn)步驟合成建文庫(kù)用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機(jī)引物，將出現(xiàn)多個(gè)小片段）。
〖干燥失重〗：≤0.50%
〖熔點(diǎn)〗：168～171℃
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：白色或米黃色結(jié)晶粉末，對(duì)濕和光敏感，有刺激性。一種檢測(cè)過氧化輕或過氧化物酶活性的色原試劑，當(dāng)加入過氧化輕或過氧化物酶時(shí)其無色水溶液變成藍(lán)綠色(zui大吸收波長(zhǎng)在655nm)。溶解于氯方和熱的甲醇，不溶于水
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)過氧化物酶的染色劑。是一種新型安全的色原試劑。與傳統(tǒng)的色原試劑聯(lián)苯胺、鄰聯(lián)甲苯胺及鄰苯二胺等相比較，TMB具有檢測(cè)靈敏度高、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)，而且使用安全。經(jīng)動(dòng)物試驗(yàn)和Ames細(xì)菌自動(dòng)變異性試驗(yàn)結(jié)果表明，TMB為非致癌物和非致突變物。
〖保存〗：2～8℃，避光，遠(yuǎn)離金屬
3,3,5,5-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽
〖英文名稱〗：TMB?2HC1；3,3,5,5-Tetramethyl benzidine dihydrochloride；4,4'-Diamino-3,3',5,5'-tetramethylbiphenyl dihydrochloride
〖其他名稱〗：TMB鹽酸鹽；3,3,5,5-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽；二鹽酸3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺
〖CAS號(hào)〗：64285-73-0
C16H20N2?2HC1=313.27
〖級(jí)別〗：BR
〖含量〗：≥98.0%
〖熔點(diǎn)〗：≥300℃
Conjugation grade
φX174RF Ⅱ DNA 一管式植物 DNAout
DAPI 干粉 一氧化氮合成酶測(cè)試盒
碘化丙啶干粉 一氧化氮檢測(cè)試劑盒 ( 化學(xué)法 )
Hoechst33258 干粉 一氧化氮檢測(cè)試劑盒 ( 硝酸還原酶法 )
Hoechst33342 干粉 一站式 Blue Native PAGE 電泳套裝
WST-1 細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒 一站式 CTAB-PAGE 電泳套裝
Furin 蛋白酶 一站式 DNA 非變性 PAGE 電泳套裝
二硫鍵異構(gòu)酶，人 一站式 DNA 尿素 -PAGE 電泳套裝
超氧化物歧化酶，人 一站式 GST 標(biāo)記蛋白質(zhì)微量純化套裝
硫氧還蛋白 一站式 GST 標(biāo)記蛋白質(zhì)微量純化套裝
一站式 MBP 標(biāo)簽蛋白純化套裝 一站式 His 標(biāo)記蛋白質(zhì)微量純化套裝
SUMO 蛋白酶 一站式 His 標(biāo)記蛋白質(zhì)微量純化套裝
TEV 蛋白酶 一站式 MBP 標(biāo)簽蛋白純化套裝
白提取試劑盒
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