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草桿菌 PCR Mix 4100 次實驗方法

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更新時間:2017-01-19 16:38:20瀏覽次數:435次

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產品簡介

草桿菌 PCR Mix 4100 次實驗方法運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細介紹

草桿菌 PCR Mix 4100 次實驗方法產品及特點:

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。

草桿菌 PCR Mix 4100 次實驗方法合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。

蘇丹Ⅳ
〖英文名稱〗:Sudan Ⅳ;Sudan red BB;Scarlet red;Solvent red 24;Oil red Ⅳ;Biebrich scarlet Rfat solube;Fat ponceau;o-Tolylazo-tolylazo-β-naphthol ;C.I. 26105 
〖其他名稱〗:蘇旦IV;四號蘇丹紅;猩紅;鄰甲苯偶氮鄰甲苯偶氮-3-萘酚;油溶暗紅;溶劑紅24;蘇丹紅B ;1-[4-(鄰甲苯偶氮)鄰甲苯偶氮]-2-萘酚;1-(2-甲基-4-(2-甲基苯基偶氮)苯基偶氮)-2-萘酚;鄰甲苯偶氮鄰甲苯偶氮-2-萘酚;油溶紅;燭紅
〖CAS號〗:85-83-6 
C24H20N4O=380.45
〖級別〗:BS
生物染色試驗:合格
〖熔點〗:186~192℃
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:深棕色粉末。無氣味。在175℃時軟化結塊,在181~188℃熔融分解,260℃全部分解。1g溶于15ml氯方,易溶于苯,溶于油、脂肪、石蠟油、*,微溶于乙醇和丙同,幾乎不溶于水。在醇或苯中呈微紫紅色溶液,醇溶液遇氫氧顯紅紫色,硫酸中顯藍綠色,稀釋則生成紅色沉淀
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)油和脂肪染色,蘇丹Ⅳ可以用油紅O代替,高溫溫度計用色
〖保存〗:RT
蘇丹Ⅲ
〖英文名稱〗:Sudan Ⅲ;Fat ponceau G;Sudan red;Cerasin red;Oil red;Solvent red 23;Tony red;Tetraazobenzene-β-naphthol, 1-(p-Phenylazophenylazo)-2-naphthol;Sudan red BK  
〖其他名稱〗:三號蘇丹紅;黃光油溶紅;油紅;苯基偶氮(4-偶氮-1)-2-萘酚;蘇旦Ⅲ;蘇丹紅Ⅲ;1-[4-(苯基偶氮)苯基偶氮]-2-萘酚;溶劑紅23;苯偶氮苯偶氮-2-萘酚;透明紅HRR 
〖CAS號〗:85-86-9 
C22H16N4O=352.39
〖級別〗:BS 
生物染色試驗:合格 
吸收光譜試驗:合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:紅棕色粉末。易溶于苯,溶于氯方、冰乙酸、乙迷、乙醇、丙同、石油醚、不揮發油、熱甘油和揮發油,不溶于水。〖熔點〗 195℃。zui大吸收波長 507(354)nm。

小鼠抗 E2 標簽單抗    小鼠白細胞分離液 1.093
小鼠抗 S1 標簽單抗    小鼠單核細胞分離液 1.090
小鼠抗 Tag-100 標簽蛋白單抗    小鼠基因組 DNA
小鼠抗 HPC4 標簽蛋白單抗    小鼠抗 CBP 標簽單抗
小鼠抗 SUMO 標簽蛋白單抗    小鼠抗 c-Myc 標簽單抗
小鼠抗 SUMO 標簽蛋白單抗    小鼠抗 c-Myc 標簽單抗
HRP 標記內參抗體 (β-actin)    小鼠抗 E2 標簽單抗
HRP 標記內參抗體 (GAPDH)    小鼠抗 Flag 標簽單抗
HRP 標記內參抗體 (β-Tubulin)    小鼠抗 Flag 標簽單抗
雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒    小鼠抗 GFP 標簽單抗
熒光染色細胞凋亡檢測試劑盒    小鼠抗 GFP 標簽單抗
離液 1.128


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