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小鼠ELISA試劑盒在操作中需要注意哪些

閱讀:249發(fā)布時間:2019-5-17

                                    小鼠ELISA試劑盒在操作中需要注意哪些

 

    在操作中應注意以下四個方面。

    1.隨著病情的進展或由其他因素影響,某些抗體在機體內的含量發(fā)生大幅波動,因此有必要對標本進行預處理,例如對血清標本作適當稀釋,或離心分離血脂等。間接法測定中,標本適當稀釋還可降低非特異性反應。

    2.加樣一般使用加液器,在小鼠ELISA試劑盒中一般有4次加樣:加標本、加酶結合物、加底物和加終止液。加標本時必須每份標本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶結合物、底物和終止液時則不需更換吸嘴。

    3.在成批手工檢測中,還應注意操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異,使抗原抗體反應和酶促反應時間不一致,對競爭法及定量檢測影響很大,不注意可能會導致錯誤結果或定量不準。

    4.洗滌是小鼠ELISA試劑盒操作過程中決定實驗成敗的一個關鍵步驟。目的是除去未結合的免疫反應物,終止抗原抗體反應,除去標本中與反應無關的成分、游離的酶標物以及反應過程中吸附于固相載體上的非特異性物質。


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