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腺病毒轉化的人胚腎細胞;AAV-293操作步驟

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                  腺病毒轉化的人胚腎細胞;AAV-293操作步驟

那年的十一月,那段的十一月,已經(jīng)整整一年了,我清晰的記得那年的寒冷是不能用今年的寒冷來形容,冰冷的風不帶一點間隙的從四面八方?jīng)坝慷鴣恚炜湛偸顷幊脸恋模刻於荚谙轮氂辏溆纸腥私^望。接下來介紹 腺病毒轉化的人胚腎細胞;AAV-293操作步驟

操作步驟:

1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。

2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。


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