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小鼠5-羥基吲哚乙酸elisa檢測試劑盒操作說明

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             小鼠5-羥基吲哚乙酸elisa檢測試劑盒操作說明

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操作步驟:

1、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl,然后再加待測樣品10µl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

2、溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。

3、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

5、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50µl,空白孔除外。

6、顯色:每孔先加入顯色劑A50µl,再加入顯色劑B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

10 分鐘.

7、終止:每孔加終止液50µl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

8、測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。


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