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課堂小知識:培養基的基本配置方法

時間:2020/12/7閱讀:1458
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培養基(Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養料,一般都含有水、氮源、無機鹽(包括微量元素)、碳源、生長因子(維生素、氨基酸、堿基、抗菌素、色素、激素和血清等)等。

產品名稱 : 培養基

英文名稱 : Medium

產品成分 : 水、氮源、無機鹽、碳源等

保存方法 : 防潮、避光、陰涼處保存

保存溫度 : 2-25℃

特殊營養物質 : 維生素、氨基酸、堿基等

作用 : 供微生物、植物和動物組織生長

培養基的配制

1.配料

配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。

2.溶解

淀粉溶解:少量冷水調成糊狀

加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃ ,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。

3.調PH

用1N的鹽酸或1N的 NaOH把培養基調節到所要求的值。

4.過濾

濾紙或棉花進行過濾。(有時可以省去)

5.分裝

一般培養基放在三角瓶或試管中滅菌使用。

(1)三角瓶

若作靜置培養,則100ml培養基/250ml的三角瓶,多不能超過150ml培養基/250ml的

三角瓶,否則滅菌時培養基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養,則15-20ml培養基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。

(2)試管分裝

液體培養基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度;

固體斜面培養基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。

6.包扎

分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。

7.滅菌

按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養成分會被破壞,培養基中的糖、氨基酸會使培養基的顏色變深。

8.擺斜面

滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個斜面,約占試管長度的1/2。

9.貯存

培養基在30℃下放置一天,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用

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