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博研科研試劑網
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兔雷帕霉素靶蛋白(mTOR)Elisa試劑盒實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中兔雷帕霉素靶蛋白(mTOR)水平。用純化的兔雷
帕霉素靶蛋白(mTOR)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入雷帕
霉素靶蛋白(mTOR),再與 HRP 標記的雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抗體結合,形成抗體-抗原-
酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色,
并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雷帕霉素靶蛋白(mTOR)呈正相
關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中兔雷帕霉素
靶蛋白(mTOR)蛋白濃度。標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性
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兔雷帕霉素靶蛋白(mTOR)Elisa試劑盒計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的
OD 值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與 OD 值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,
即為樣品的實際濃度。
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