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上海酶聯(lián)細(xì)胞培養(yǎng)基簡(jiǎn)述

2025年03月13日 09:05上海酶聯(lián)生物科技有限公司點(diǎn)擊量:157

培養(yǎng)的細(xì)胞需要細(xì)致的環(huán)境控制才能成功生長(zhǎng)和維持。全面的方法包括確保無(wú)菌、營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)、pH穩(wěn)定性和溫度控制。

無(wú)菌條件和營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)為了防止污染并確保細(xì)胞存活,無(wú)菌環(huán)境至關(guān)重要。這通常是通過(guò)無(wú)菌技術(shù)和專(zhuān)門(mén)設(shè)備如層流罩來(lái)實(shí)現(xiàn)的。營(yíng)養(yǎng)是通過(guò)培養(yǎng)基提供的,培養(yǎng)基中含有多種必需成分,

氨基酸:

蛋白質(zhì)的組成部分;有些是必需的,不能由細(xì)胞合成。

媒體變體和優(yōu)化

多年來(lái),已經(jīng)開(kāi)發(fā)了各種基礎(chǔ)培養(yǎng)基來(lái)滿足特定細(xì)胞類(lèi)型的需要:

基礎(chǔ)培養(yǎng)基,

*低必需培養(yǎng)基(MEM),用于原代培養(yǎng)和二倍體細(xì)胞。

復(fù)雜介質(zhì):

RPMI1640一樣,它們適用于更廣泛的哺乳動(dòng)物細(xì)胞。

維生素:

作為酶促反應(yīng)的輔助因子;b族維生素對(duì)細(xì)胞新陳代謝至關(guān)重要。

脂肪酸和脂類(lèi):

細(xì)胞膜完整性和功能的基本成分。

蛋白質(zhì)和肽:

在無(wú)血清培養(yǎng)基中,這些取代了通常由血清提供的生長(zhǎng)因子和結(jié)合蛋白。

血清:

雖然無(wú)血清替代品越來(lái)越受歡迎,以減少可變性和污染風(fēng)險(xiǎn),但通常作為生長(zhǎng)因子的來(lái)源。

pH和溫度穩(wěn)定性:

細(xì)胞通常需要7.2-7.4的pH范圍以實(shí)現(xiàn)最佳生長(zhǎng)。這是由緩沖系統(tǒng)調(diào)節(jié)的,緩沖系統(tǒng)可以是基于CO2/碳酸氫鹽的,也可以是使用諸如HEPES之類(lèi)的試劑通過(guò)化學(xué)方法實(shí)現(xiàn)的。溫

度保持在37°C左右,以模擬生理?xiàng)l件。

無(wú)血清培養(yǎng)基:

為特定應(yīng)用量身定制,降低動(dòng)物源性成分的污染風(fēng)險(xiǎn)。

媒體準(zhǔn)備和質(zhì)量控制

培養(yǎng)基可以由基本成分在內(nèi)部制備,也可以購(gòu)買(mǎi)現(xiàn)成的溶液。質(zhì)量控制包括確保沒(méi)有污染物和成分的適當(dāng)濃度。粉末培養(yǎng)基的復(fù)原需要高等級(jí)的水,并且制備的培養(yǎng)基必須滅菌,

通常通過(guò)過(guò)濾。

血清使用和安全注意事項(xiàng)

血清,尤其是胎牛血清(FBS)的使用是常見(jiàn)的,因?yàn)槠浜胸S富的生長(zhǎng)因子,然而,由于對(duì)瘋牛病等疾病的關(guān)注,嚴(yán)格的測(cè)試和采購(gòu)協(xié)議是為了確保安全。

法規(guī)指導(dǎo)動(dòng)物源材料的培養(yǎng),強(qiáng)調(diào)采購(gòu)和測(cè)試的重要性,在可能的情況下消除這些材料的趨勢(shì)反映在開(kāi)發(fā)無(wú)血清和無(wú)動(dòng)物的培養(yǎng)基替代品中。

總之細(xì)胞培養(yǎng)基在體外細(xì)胞的生長(zhǎng)和維持中起著重要作用,每種成分都經(jīng)過(guò)精心選擇和優(yōu)化,以模擬體內(nèi)環(huán)境,確保細(xì)胞具有生長(zhǎng)、存活和功能性條件。

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