1、畢氏酵母氯化鋰轉化法  
（1）試劑  
1MLiCl（用去離子蒸餾水配制，濾膜過濾除菌；必要時用消毒去離子水稀釋）  
50%PEG3350（SigmaP3640用去離子蒸餾水配制，濾膜過濾除菌，用較緊的蓋子的瓶子分裝）  
2mg/mlsalmonspermDNA/TE（10mMTris-Cl,pH8.0,1.0mMEDTA）-20℃保存  
注：醋酸鋰對畢氏酵母無效，僅氯化鋰有效；PEG3350可屏蔽高濃度LiCl的毒害作用；  
（2）感受態畢氏酵母的制備  
接種Pachiapastoris到50mlYPD培養基中，30℃搖菌過夜（約24～28h）培養到OD值為0.8～1.0（約108Cells/ml）；  
收獲細胞，用25ml無菌水洗滌一次，室溫下1500g離心10min；  
重懸細胞于1ml100mMLiCl溶液中，將懸液轉入1.5ml離心管；  
離心機zui大速度離心15秒沉淀菌體，重懸菌體于400ul100mMLiCl溶液中；  
按50ul/管分裝，立即進行轉化；  
注：不要將感受態酵母菌冰浴；  
（3）畢氏酵母的轉化  
煮沸1ml鮭魚精DNA5min，迅速冰浴以制備單鏈擔體DNA；  
將感受態酵母菌離心，以Tips去除殘余的LiCl溶液；  
對于每一個轉化，按以下順序加入：  
50%PEG3350240ul  
1MLiCl36ul  
2mg/ml單鏈SalmonspermDNA25ul  
5～10ug/50ulH2O質粒DNA50ul