1. 標本采集 在無菌條件下于健康產婦分娩后立即取新生兒臍帶， 擠出臍帶血管中的血液，放入裝有含青鏈霉素的PBS液瓶中，2h之內行臍靜脈內皮細胞培養。
雙抗：青霉素100u/ml; 鏈霉素100μl/ml
PBS：KCl 0.2 g/L, KH2PO4 0.24 g/L, NaCl 8.0g/L, Na2HPO4•7H2O 1.56g/L或Na2HPO4 1.44 g/L。 在800ml蒸餾水中加入上述質量物質，用鹽酸調節溶液的pH值至7.4，加水定容至1L，高壓蒸汽滅菌20分鐘，室溫保存。

2. 原代血管內皮細胞的獲取與培養 按Jaffe等人〔1〕的方法加以改進。在無菌條件下取新生兒臍帶，剪去鉗痕和凝血塊阻塞部分，找到臍靜脈。一端插上帶有膠管的玻璃管結扎固定，經膠管接注射器，用生理鹽水灌洗。待臍靜脈內的殘血除凈后，用37℃ PBS，沖洗兩次，將另一端用鐵夾夾閉，向臍靜脈內灌注0.25%胰蛋白酶8～10ml，夾閉膠管放入已滅菌的大平皿中。37℃孵育12min，在此期間經常翻動臍帶使酶溶液在血管內流動以促使內皮細胞均勻與酶接觸。取出臍帶后輕輕擠壓管壁，將含有內皮細胞的胰蛋白酶注入50ml錐形離心管中，加入小牛血清2ml終止酶反應。再以30ml PBS沖洗管腔，流出液一并入離心管，1000r/min離心10min，棄上清，加入含有10%小牛血清的DMEM