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溶解性:大多肽的道選溶劑是超純抽氣水。稀乙酸或氨水分別對(duì)于堿性或酸性多肽的溶解很重要。這些方法不溶的多肽,需要DMF、脲、guanidiniamchloride或acetonitnle來溶解,這些溶劑...
克拉霉素Clarithromycin別名克拉霉素,甲氧基紅霉素,甲基紅霉素,克拉紅霉素,克拉仙霉素,克紅霉素Cas號(hào)81103-11-9分子式C38H69NO13分子量747.96結(jié)構(gòu)式訂貨信息貨號(hào)純...
一、RibocloneM-MLV(H-)cDNA合成技術(shù)Promega公司的RibocloneRM-MLV(H-)cDNA合成系統(tǒng)采用M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶的RNaseH缺失突變株取代AMV反轉(zhuǎn)錄酶,使合...
實(shí)時(shí)熒光定量pcr技術(shù)于1996年由美國(guó)AppliedBiosystems公司推出,由于該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規(guī)PCR相比,它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動(dòng)化...
PCR文獻(xiàn)庫(kù)常用檢索用詞來源于Medline光盤數(shù)據(jù)庫(kù)索引系統(tǒng)及詞表系統(tǒng)提供的檢索標(biāo)識(shí)與PCR技術(shù)相關(guān)的醫(yī)學(xué)主題如下:簡(jiǎn)稱全稱中文譯名PCRPolymeraseChainReaction聚合酶鏈反應(yīng)P...
如果PCR反應(yīng)條件不能產(chǎn)生所需的特異性產(chǎn)物,可采用新的寡核苷酸重新進(jìn)行擴(kuò)增,或用凝膠電泳來分離不同的PCR產(chǎn)物,而后再各自重新擴(kuò)增進(jìn)行序列分析。長(zhǎng)度不同的片段可以用瓊脂糖凝膠電泳來分離:1.片段大小在...
增加PCR的特異性:1.primersdesign這是zui重要的一步。理想的,只同目的序列兩側(cè)的單一序列而非其他序列退火的引物要符合下面的一些條件a.足夠長(zhǎng),18-24bp,以保證特異性.當(dāng)然不是說...
焦磷酸測(cè)序(Pyrosequencing)技術(shù)是新一代DNA序列分析技術(shù),該技術(shù)無須進(jìn)行電泳,DNA段也無須熒光標(biāo)記,操作極為簡(jiǎn)便。Pyrosequencing技術(shù)是由4種酶催化的同一反應(yīng)體系中的酶級(jí)...
這一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。含有乙二醛-DMSO的凝膠比含有甲醛的凝膠更難于進(jìn)行電泳,因?yàn)榍罢哂緞?dòng)速率較慢而且需將電泳液時(shí)行循環(huán)以避免電泳過程中形成過高的H+梯度。...
【1】.DEAE-葡聚糖法一、實(shí)驗(yàn)材料:1.50mg/mlDEAE-葡聚糖溶液(500mgDEAE-葡聚糖溶于10ml水,1ml分裝,高壓滅菌,儲(chǔ)存于-20℃)(Sigma)2.TBS溶液(PH7.4...
[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯1了解細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)原理和基本方法2磷酸鈣沉淀法的基本技術(shù)要點(diǎn)[實(shí)驗(yàn)原理]磷酸鈣沉淀法是基于磷酸鈣-DNA復(fù)合物的一種將DNA導(dǎo)入真核細(xì)胞的轉(zhuǎn)染方法,磷酸鈣被認(rèn)為有利于促進(jìn)外源DNA與靶細(xì)胞...
人類基因組大規(guī)模測(cè)序已經(jīng)基本完成。但破解基因組的序列只是一個(gè)起點(diǎn),目前多數(shù)基因的功能還不清楚,因此基因功能的研究是今后的發(fā)展趨勢(shì)。傳統(tǒng)研究基因功能的zui有效技術(shù)之一是細(xì)胞和小鼠的基因敲除技術(shù)。但該技...
RNAi是由雙鏈RNA所引起的序列特異性基因沉默。RNAi首先由Fire等發(fā)現(xiàn)于秀麗隱桿線蟲(C.elegans)中,他們發(fā)現(xiàn)將dsRNA注入線蟲體內(nèi)后可抑制序列同源基因的表達(dá),并證實(shí)這種抑制主要作用...
Northern印跡的制備預(yù)備:1.按下述步驟,每泳道加10~20μg總RNA或0.5~1μgpoly(A)+RNA進(jìn)行甲醛/瓊脂糖凝膠電泳,將凝膠放在紫外線透照儀上,旁邊置一標(biāo)尺進(jìn)行拍照。a.總RN...
PCR產(chǎn)物的電泳檢測(cè)時(shí)間一般為48h以內(nèi),有些于當(dāng)日電泳檢測(cè),大于48h后帶型不規(guī)則甚致消失。假陰性,不出現(xiàn)擴(kuò)增條帶pcr反應(yīng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)有①模板核酸的制備,②引物的質(zhì)量與特異性,③酶的質(zhì)量及,④PCR...
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