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生物界的豐富多彩很大程度上取決于嚴格調控下的基因的選擇性表達。高等生物的細胞內約含有105個不同的基因,而主基因在某個特定的細胞中,只有占15%的一小部分表達。而且在不同的細胞中,選擇性表達的基礎也是...
通常所用的PCR方法都在兩個方面有局限,即目標產物程度和合成片段的大小。Pfu(Pyrococcusfuriosus)dna聚合酶,具有完整的3’外切酶校讀活性(3’-editing-exonucle...
PCR技術(多聚酶鏈式反應)是現代分子生物學的一個巨大突破,它能在體外迅速、大量、靈敏地擴增基因片段。可是,經PCR技術擴增的大量相關基因片段如何能有效拼接,卻是一個很值行探討的問題。傳統的方法是引入...
zui近由于RNA干擾(RNAinterference,RNAi)的發現使反義領域的研究增多。這種自然發生的現象zui早是在秀麗線蟲中發現的(1),是序列特異性地使轉錄后的基因沉默的有力機制。由于zu...
測序策略目前應用的兩種快速序列測定技術是Sanger等(1977)提出的酶法及Maxam和Gilbert(1977)提出的化學降解法。雖然其原理大相徑庭,但這兩種方法都是同樣生成互相獨立的若干組帶放射...
克服文庫構建的缺陷傳統的cdna文庫構建途徑有許多與生俱來的缺陷:1)cDNA合成不佳,2)連接效率低,3)在限制性酶切過程中造成克隆缺口或者斷裂。任何一種缺陷都有可能造成目的克隆的丟失,尤其對于低豐...
Vasoactiveintestinalpeptide(VIP)andthestructurallyrelatedpituitaryadenylatecyclase-activatingpolypep...
Caspase是一類對天冬氨酸特異的半胱氨酸蛋白酶,是與秀麗隱桿線蟲Ced一3具有序列和結構同源性的一個蛋白家族,在細胞凋亡執行過程中直接參與早期凋亡啟動、信號傳遞及晚期凋亡效應,除此之外,部分cas...
一、無血清培養基的基本配方:基本成分為基礎培養基及添加組分兩大部分。用于生物制藥和疫苗生產的細胞在體外培養時,多數呈貼壁生長或兼性貼壁生長;而當其在無血清、無蛋白培養基中生長時,由于缺乏血清中的各種粘...
實驗目的1.熟悉并掌握Feulgen反應的原理及其實驗操作方法2.對細胞的免疫組化研究方法有一初步的認識實驗原理自Feulgen等發明該顯示DNA的Feulgen反應法以來,其作用機制也久經研究和討論...
近年來,基于pcr擴增的基因診斷技術備受青睞,細菌核糖體16S小亞基基因(16SrDNA)鑒定引起了科研人員的廣泛關注。16SrDNA是細菌的系統分類研究中zui有用的和zui常用的分子鐘,其種類少,...
1轉染前一天將293T細胞鋪于10cm板,當細胞密度達到80%左右即可進行PEI轉染。2將下列DNA加入一個已裝有480ul1*HBS(PH7.4)滅菌管混勻三質粒系統:12ugvector6ugVS...
實驗原理定義:染色體組型又稱核型,是指將動物、植物、真菌等的某一個體或某一分類群(亞種、種、屬等)的體細胞內的整套染色體,按它們相對恒定的特征排列起來的圖像。核型模式圖是指將一個染色體組的全部染色體逐...
一、顯微鏡的結構及使用方法?1、光學顯微鏡的主要構造機械部分照明部分光學部分?2、光學顯微鏡的使用方法對光→置片→低倍→高倍→復原低倍鏡使用高倍鏡使用?3、使用光學顯微鏡的注意事項二、酸性蛋白和堿性蛋...
§污染是細胞培養的大敵。預防和避免污染是細胞培養成功的關鍵之一。§一開始就要十分重視,防止污染,否則會前功盡棄,不僅浪費時間,而且浪費人力、物力,甚至造成無法彌補的損失。(一)污染的類型§細胞培養過程...
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