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上海士鋒生物科技有限公司
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26 2015-10

棉花組織總RNA 的快速提取方法

棉花組織RNA的提取是進行棉花分子生物學研究的必要前提。進行Northern雜交分析、體外翻譯、建立cDNA文庫、RT2PCR及差異顯示分析等研究都需要高質量的RNA(李宏和王新力,1999;趙雙宜等...

21 2015-10

用異硫氰酸胍和有機溶劑提取RNA

收集細胞,離心5000r/min,5分鐘,棄上清,加入異硫氰酸胍變性液(異硫氰酸胍4mol/L;檸檬酸鈉25mmol/L,Sarkosy10.5%,β-巰基乙醇0.1mol/L)500ml,混勻,振蕩...

14 2015-10

長PCR技術及其在動物學研究中的應用

摘要:長PCR(longPCR)技術自1994年發明以來,在生命科學發展中發揮了巨大的作用。長PCR技術與常規PCR有較大的區別。本文從長PCR技術的由來、長PCR技術對模板、引物和聚合酶的特殊要求及...

23 2015-9

PCR技術的應用與微生物系統進化研究的發展

分類和進化研究是生物學中zui古老的領域之一。過去的研究主要依靠生物體的形態,并輔以生理特征,來探討生物間親緣關系的遠近,有人稱之為經典的方法,它是一百多年來完成微生物分類的主要方法。經典的方法是隨機...

21 2015-9

如何進行單個細胞的PCR分析

單個二倍體細胞在分析單精子以前,Li等人對個體二倍體細胞內的β珠蛋白基因進行過研究。兩個組織培養細胞株用于這些實驗。其中一個純合是鐮刀型細胞密碼子6(βS)發生突變,另一個純合子則來源于正常的βB等位...

16 2015-9

mRNA差別顯示技術[DDRT

隨著PCR技術的發展,人們在此基礎上建立起了一系列基于基因分離的新技術新方法。如mRNA差別顯示技術(DDRT-PCR)、以及進一步改進的代表性差示分析(RAD),抑制性扣除雜交(SSH)和交互扣除R...

6 2015-9

RNAi技術新突破:根據SNP選擇性沉默突變基因

對于某些遺傳病而言,從雙親繼承一個拷貝的突變基因就足以致病。現在,愛荷華大學的研究人員證明有可能在沉默一個基因的突變拷貝的同時不影響另一個正常拷貝的表達。這一發現表明有一天基因沉默技術或許可以用于多種...

31 2015-8

RNA干擾技術的原理和應用

RNAi是由雙鏈RNA所引起的序列特異性基因沉默。RNAi首先由Fire等發現于秀麗隱桿線蟲(C.elegans)中,他們發現將dsRNA注入線蟲體內后可抑制序列同源基因的表達,并證實這種抑制主要作用...

28 2015-8

植物基因分離的圖位克隆技術

定位克隆(positoinalcloning),又稱圖位克隆(map-basedclonig),1986年首先由劍橋大學的AlanCoulson提出。用該方法分離基因是根據功能基因在基因組中都有相對較...

20 2015-8

放射性同位素標記的DNA序列測定分析

放射性同位素標記的DNA序列測定分析測定DNA的核苷酸序列是分析基因結構與功能關系的前提。從小片段重疊法到加減法、雙脫氧鏈終止法、化學降解法、自動測序,DNA測序技術發展很快。目前在實驗室手工測序常用...

11 2015-8

如何進行PCR的污染與對策

一、污染原因(一)標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染,或標本放置時,由于密封不嚴溢于容器外,或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中,由于吸樣槍污染導致標本間污染...

5 2015-8

EST技術及其在基因全長cDNA克隆上的應用策略

1、ESTs與基因識別EST技術zui常見的用途是基因識別,傳統的全基因組測序并不是發現基因zui有效率的方法,這一方法顯得即昂貴又費時。因為基因組中只有2%的序列編碼蛋白質,因此一部分科學家支持首先...

27 2015-7

RNA實驗操作中的一般要求

在所有RNA實驗中,zui關鍵的因素是分離得到全長的RNA。而實驗失敗的主要原因是核糖核酸酶(RNA酶)的污染。由于RNA酶廣泛存在而穩定,一般反應不需要輔助因子。因而RNA制劑中只要存在少量的RNA...

24 2015-7

蛋白質相互作用的研究

蛋白質是生命活動的執行者,細胞內的生理變化都是通過蛋白質來實現的。但是生命活動中各項功能和行為不是由單一的蛋白質來完成的,需要蛋白質與蛋白質,蛋白質與核酸之間的相互作用來實現的。蛋白-蛋白互作網絡與轉...

20 2015-7

極譜氧電極法測定超氧化物歧化酶活性

極譜法(polarography)通過測定電解過程中所得到的極化電極的電流-電位(或電位-時間)曲線來確定溶液中被測物質濃度的一類電化學分析方法。于1922年由捷克化學家J.海洛夫斯基建立。極譜法和伏...

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