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啟動子克隆方法研究進展2017/8/14

隨著基因工程的發(fā)展，常常需要構(gòu)建一種能高水平表達(dá)異源蛋白質(zhì)的表達(dá)載體。啟動子對外源基因的表達(dá)水平影響很大，是基因工程表達(dá)載體的重要元件。因此研究啟動子的克隆方法，對研究基因表達(dá)調(diào)控和構(gòu)建表達(dá)載體至關(guān)重...

PCR反應(yīng)的五要素2017/8/7

1、引物引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大...

免疫PCR [Immuno PCR, Im2017/8/2

一、定義；免疫PCR是利用抗原抗體反應(yīng)的特異性和pcr擴增反應(yīng)的*靈敏性而建立的一種微量抗原檢測技術(shù)。用抗體檢測抗原是免疫學(xué)的zui基本方法，用酶或同位素標(biāo)記抗體可使檢測的敏感性提高，常用的定量檢測方...

RNA質(zhì)量的經(jīng)驗談！2017/7/18

1）檢測RNA溶液的吸光度280、320、230、260nm下的吸光度分別代表了核酸、背景（溶液渾濁度）、鹽濃度和蛋白等有機物的值。一般的，我們只看OD260/OD280（Ratio，R）。1.82....

基因克隆：感受態(tài)細(xì)胞制作2017/7/10

方法一A液：1M，MnCl2：B液：1M，HEPES，pH=6.2-6.8，用無菌水配，配后不需滅菌；C液稱取CaCl20.10g，KCl1.18g，全部轉(zhuǎn)入細(xì)口試劑瓶，然后加入46ml三蒸水，輕輕振...

推薦：RNA的制備2017/7/4

一、mRNA的分離與rRNA和tRNA不同的是，哺乳動物細(xì)胞的絕大部分mRNA在其3’端均有一poly(A)尾，因此可以用oligo(dT)－纖維素親和層析法從大量的細(xì)胞RNA中分離mRNA。在構(gòu)建c...

用RNAi技術(shù)研究基因功能2017/6/29

February6,2004—AmethodfordeterminingthefunctionoflargenumbersofgenesisbeingdevelopedａndpilotedbyHowa...

RNAi的應(yīng)用2017/6/26

1.研究基因功能的新工具已有研究表明RNAi能夠在哺乳動物中滅活或降低特異性基因的表達(dá)，制作多種表型，而且抑制基因表達(dá)的時間可以隨意控制在發(fā)育的任何階段，產(chǎn)生類似基因敲除的效應(yīng)。線蟲和果蠅的全部基因組...

RNAi技術(shù)的研究進展與發(fā)展前景2017/6/22

(RNAinterference，RNAi)是1998年由Fire等在線蟲中發(fā)現(xiàn)的一種轉(zhuǎn)錄后的基因沉默(Posttranscriptionalgenesilencing，PTGS)機制。雙鏈RNA(d...

士鋒EST技術(shù)介紹2017/6/15

摘要：隨著人類基因組計劃的順利進行，EST技術(shù)被廣泛應(yīng)用于基因識別、繪制基因表達(dá)圖譜、尋找新基因等研究領(lǐng)域。利用人類基因組研究不斷產(chǎn)生的數(shù)據(jù)，從ESTs即cDNA的部分序列入手，通過同源篩選，獲得基因...

士鋒PCR技術(shù)（五）：常見問題分析與對策2017/6/12

PCR產(chǎn)物的電泳檢測時間一般為48h以內(nèi)，有些于當(dāng)日電泳檢測，大于48h后帶型不規(guī)則甚致消失。假陰性，不出現(xiàn)擴增條帶pcr反應(yīng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)有①模板核酸的制備，②引物的質(zhì)量與特異性，③酶的質(zhì)量及，④PCR...

RNAi在動物實驗中表現(xiàn)良好2017/6/2

研究人員利用包裝入病毒載體中的小分子RNA對有遺傳疾病的小鼠進行治療。這一成果提高了RNA干擾技術(shù)能夠運用在人類臨床試驗上的可能性。亨丁頓舞蹈癥（Huntington’sdisease）和脊髓性小腦萎...

PCR技術(shù)*講座2017/5/31

聚合酶鏈反應(yīng)(PolymeraseChainReaction,PCR)是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴增技術(shù)。它具有特異、敏感、產(chǎn)率高、快速、簡便、重復(fù)性好、易自動化等突出優(yōu)點；能在一個試管內(nèi)將所要...

煙酰胺乙酰膽堿受體在凋亡中的作用通路圖2017/5/24

煙酰胺乙酰膽堿受體在凋亡中的作用Nicotinicacetylcholinereceptorsareessentialforneuromuscularsignalingａndarealsoexpres...

Fas/Fas L信號通路圖2017/5/22

fas/FasL信號通路zui早被證明在細(xì)胞凋亡中起著重要的作用。Fas是一種跨膜蛋白，屬于腫瘤壞死因子受體超家族成員，它與FasL結(jié)合可以啟動凋亡信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)引起細(xì)胞凋亡。它的活化包括一系列步驟：首先...