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一、準(zhǔn)備工作準(zhǔn)備工作對(duì)開展細(xì)胞培養(yǎng)異常重要,工作量也較大,應(yīng)給予足夠的重視,推備工作中某一環(huán)節(jié)的疏忽可導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或無(wú)法進(jìn)行。準(zhǔn)備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅...
污染是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中面臨的主要問題。某些污染的發(fā)生往往難以察覺檢測(cè),而且污染源能長(zhǎng)期共存于培養(yǎng)體系中,這類染事實(shí)上大部分被人們忽視了。培養(yǎng)的細(xì)胞作為個(gè)生物體,會(huì)對(duì)培養(yǎng)環(huán)境以及環(huán)境中的污染物作相應(yīng)的反應(yīng)...
掌握人體微量血液體外培養(yǎng)制備染色體標(biāo)本的方法。二、實(shí)驗(yàn)原理人外周血液中的小淋巴細(xì)胞,幾乎都處在G1期(G0期),一般情況下是不再分裂的,在培養(yǎng)液中加入植物凝血素(PAH)時(shí),這種小淋巴細(xì)胞受刺激轉(zhuǎn)化為...
細(xì)胞受各種霉菌、細(xì)菌和支原體污染后,一般都較難排除或殺滅,其中以支原體更難排除,因此從預(yù)防著眼為上。1)抗生素除菌法:用BM-1(截耳素衍生物)和BM-2(四環(huán)素衍生物)抑制支原體1.抗生素制備:均可...
本方法是通過促細(xì)胞分裂劑與細(xì)胞表面受體相互作用,在體外觸發(fā)細(xì)胞的多克隆激活。根據(jù)所使用的促細(xì)胞分裂劑的不同,應(yīng)答細(xì)胞可以是T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞,或兩者同時(shí),或者是單核細(xì)胞。細(xì)胞激活可以通過細(xì)胞增殖、...
1.標(biāo)本采集在無(wú)菌條件下于健康產(chǎn)婦分娩后立即取新生兒臍帶,擠出臍帶血管中的血液,放入裝有含青鏈霉素的PBS液瓶中,2h之內(nèi)行臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)。雙抗:青霉素100u/ml;鏈霉素100μl/mlPBS...
【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹苛私夂怂帷⒌鞍踪|(zhì)、糖及酶的細(xì)胞化學(xué)反應(yīng)原理,掌握Brachet反應(yīng)及堿性蛋白、酸性蛋白、糖原和過氧化物酶的細(xì)胞化學(xué)染色方法?!緦?shí)驗(yàn)用品】一、材料和標(biāo)本蟾蜍、小白鼠各一只、肝臟石臘切片、培養(yǎng)...
在正常情況下,人外周血中是沒有分裂相的,只有在異常情況下才能發(fā)現(xiàn)。植物血球凝集素(PHA)是人類淋巴細(xì)胞有絲分裂的刺激劑,在PHA作用下,原處于Go期的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞,進(jìn)而進(jìn)行有絲分裂。利用...
細(xì)胞培養(yǎng)是將器官、組織或細(xì)胞從生物機(jī)體中取出,模擬該器官、組織或細(xì)胞在機(jī)體內(nèi)的生理?xiàng)l件,在體外進(jìn)行培養(yǎng),使其能夠繼續(xù)生存、生長(zhǎng)和繁殖。一些研究結(jié)果表明,許多種類的動(dòng)物或植物的細(xì)胞都能在人工培養(yǎng)條件下生...
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^實(shí)驗(yàn),初步掌握動(dòng)、植物染色體C帶分帶技術(shù)。二、實(shí)驗(yàn)原理C帶是顯帶技術(shù)中zui簡(jiǎn)單的一種帶型。使用這種技術(shù),能使著絲粒型的異染色質(zhì)著色,這種異染色質(zhì)通常位于著絲粒周圍并常含有高度重復(fù)序列...
1、平端連接通常情況下,PCR產(chǎn)物可直接與平端載體DNA進(jìn)行連接,但其連接效率效低。因?yàn)門aqDNA聚合酶具有非模板依賴性末端轉(zhuǎn)移酶活性,能在兩6條DNA鏈的3'末端加上一個(gè)多余的堿基,使合成的PCR...
PCR引物設(shè)計(jì)中的一個(gè)重要參數(shù)即是熔解溫度(Tm)。這是當(dāng)50%的引物和互補(bǔ)序列表現(xiàn)為雙鏈DNA分子時(shí)的溫度。Tm對(duì)于設(shè)定pcr退火溫度是必需的。在理想狀態(tài)下,退火溫度足夠低,以保證引物同目的序列有效...
細(xì)胞的分化是一個(gè)非常復(fù)雜的過程,也是當(dāng)今生物學(xué)研究的熱點(diǎn)之一。由一個(gè)受精卵發(fā)育而成的生物體的的各種細(xì)胞,在形態(tài),結(jié)構(gòu)和功能上為什么會(huì)有明顯的差異呢?這就和細(xì)胞的分化有關(guān)。細(xì)胞的分化是指分裂后的細(xì)胞,在...
一、原理:氨基酸是兩性電解質(zhì),不能直接通過酸堿滴定來(lái)計(jì)算其含量。但在常溫下,甲醛能迅速與氨基酸的氨基結(jié)合,生成羥甲基化合物,使上述平衡右移,促使-NH3釋放H+,使溶液的酸度增加,滴定終點(diǎn)移至酚酞的變...
二、呈色反應(yīng)(一)雙縮脲反應(yīng):1、原理:尿素加熱至180℃左右,生成雙縮脲并放出一分子氨。雙縮脲在堿性環(huán)境下能與Cu2+結(jié)合生成紫紅色化合物,此反應(yīng)稱為雙縮脲反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子中有肽鍵,其結(jié)構(gòu)與雙縮脲相...
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